应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 提取RNA前组织样品的保存
51/1返回列表
查看: 7031  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

dzdingo

铜虫 (小有名气)

[求助] 提取RNA前组织样品的保存 已有2人参与

我需要从卵里面提取总RNA，因为卵的数量比较多，一次用不完，要放入-80的冰箱里保存。在网上查保存方法，有些说在放入-80冰箱前要先放在液氮中处理半个小时，有些说可以直接放入-80冰箱。我的理解是:保存前的处理都是要降低RNA酶的活性，既然-80可以长期保存组织，那么液氮处理也不是必需的吧。

问题如下：1、关于RNA酶活性。-80和液氮两种条件下RNA酶活性的区别大吗？
                 2、如果需要在液氮中处理，怎么处理，是放在ep管理然后直接投入液氮中吗？ep管用之前需要进行DEPC处理吗？在液氮中放的时间久了ep管不会出问题吧？处理完取出后直接就把ep管放入-80冰箱？
                 3、液氮处理的时间，多久合适？是固定的吗，还是根据组织来定，需要自己进行摸索？

由于我是第一次做，而且以前没什么分子生物学的基础，希望各位懂得的大哥大姐能给指点一下，小弟在此感激不尽。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生化实验经验积累

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-06-07 15:46:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

youlinglyw

荣誉版主 (著名写手)

一匡天下

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+4, 鼓励交流经验！ 2014-06-08 02:51:56
液氮冷春保存的好些，快速冷冻，结果也好，其实放-80也没啥问题，但是我们都是先液氮后-80 ，我测算过，液氮的话，大约30秒就可以彻底冷冻，而-80至少5分钟以上，一般都20多分钟（我是组织），这么长的时差，影响肯定存在

用ep管放置，一般的话，要处理下，或者直接买无RNA酶的管子，然后放液氮的时候，你先把管子放在泡沫盒里，然后往里面倒液氮。这样放置放在液氮罐里炸裂。

放进去一两分钟然后捞出来就可以了，处理时间没太多影响
赞一下(1人) 回复此楼
天行健
3楼2014-06-07 23:38:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

Lau_Kimura

铁虫 (正式写手)
★ ★ ★
gyesang: 金币+3, 鼓励交流！ 2014-06-08 02:51:02
1. 液氮速冻，比直接放-80绝对要快得多，效果也更好。

2. 用保温盒装液氮，内放浮板，ep管（进口/国产DEPC处理，盖子用镊子穿洞防爆破）装液氮后放在浮板上，在往ep管放样品，取出后在液氮快挥发完盖上盖子，投入液氮暂存，全部样品处理完后一起转移至-80。ep管的盖子打洞后，液氮中放多久都行。

3. 按2操作即可，液氮直接升华而速冻，几秒钟的事情。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2014-06-07 21:42:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

所谓医人z

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励交流！ 2014-06-08 02:52:14
我做过组织冻存，直接放在-80℃里面，感觉没什么影响。液氮没用过，刚好学习一下 ( ￣▽￣)"
赞一下 回复此楼
4楼2014-06-08 00:21:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dzdingo

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Lau_Kimura at 2014-06-07 21:42:33
1. 液氮速冻，比直接放-80绝对要快得多，效果也更好。

2. 用保温盒装液氮，内放浮板，ep管（进口/国产DEPC处理，盖子用镊子穿洞防爆破）装液氮后放在浮板上，在往ep管放样品，取出后在液氮快挥发完盖上盖子，投入 ...

抱歉啊，刚考完那该死的中特，好久没来过了。我要做的是昆虫的卵，非常小，如果按你说的这种方法，把卵放入ep管后会不会出现飞溅的情况啊。
赞一下 回复此楼
5楼2014-06-12 10:57:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-09-02 00:19 by xiangy672
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 面上函评意见出来了，像什么等级？ 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗？ +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中，共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭