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weiyuanzheng

铜虫 (小有名气)

[求助] Western-blot 实验的目的条带 已有3人参与

各位老师,师兄师姐,最近做Western-blot实验,发现目的条带总是大于预测的大小,大致大0.3-0.5kDa左右,急切求解。是什么原因导致的呢,单抗是公司做的,抗原表位也没有错误。还有有师姐说可能是糖基化造成的,去除糖基化后,目的条带会变小至预测大小;我分析了一下大致有两个糖基化位点,这有可能吗?望各位大虾指教,谢谢啦
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没有人生来洒脱,都总是在哭过以后才会感到轻松许多。
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
蛋白质修饰是有可能的,不一定是糖基化。我的蛋白比预计大22 kDa,一直不知道为什么。
5楼2014-06-06 10:29:06
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qianjinyu

铜虫 (初入文坛)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
理论分子量和实际分子量(表观)差一点正常
2楼2014-06-06 09:59:59
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weiyuanzheng

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by qianjinyu at 2014-06-06 09:59:59
理论分子量和实际分子量(表观)差一点正常

不是呀,写错啦,大致大了3kDa左右,分析了一下,糖基化位点两个,磷酸化位点好多!
没有人生来洒脱,都总是在哭过以后才会感到轻松许多。
3楼2014-06-06 10:18:49
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weiyuanzheng

铜虫 (小有名气)

不好意思啊,写错啦,大致大3kDa左右。
没有人生来洒脱,都总是在哭过以后才会感到轻松许多。
4楼2014-06-06 10:20:23
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