求助25kD, 50 kD, 75 kD, 100 kD, 125 kD和150 kD的蛋白分离手段 - 分析 - 色谱质谱

11楼2014-06-06 04:09:36

silence18

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6楼: Originally posted by fish_crying at 2014-06-04 14:43:58
上面是UPLC上使用的SEC柱，HPLC上用过TSKgel G3000swxl, 7.8*300 mm的SEC柱...

有没有试用过，两个TSK的色谱柱串联，试试看看。

12楼2014-06-06 15:53:41

fish_crying

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7楼: Originally posted by shinexzl at 2014-06-05 08:39:01
用C4的反相柱试一下，挑个专门做蛋白质的，孔径要大于300唉，加点TFA可以直接连MS

试过PLRP 5um 1000A和500A的，都不理想

13楼2014-06-06 16:22:09

fish_crying

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8楼: Originally posted by swallow13 at 2014-06-05 22:17:29
不可以用2D-PAGE+MALDI-MS吗？

恩，不行，因为想连质谱测精确分子量，不是鉴定蛋白

14楼2014-06-06 16:23:28

fish_crying

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9楼: Originally posted by zcj584 at 2014-06-05 23:01:54
用电泳不行吗？分离蛋白质不是都用电泳吗？

恩，SDS好像不行，因为想连质谱测精确分子量。

15楼2014-06-06 16:25:06

fish_crying

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10楼: Originally posted by kaobo2012 at 2014-06-05 23:15:26
跑sds page,然后考染，将目标条带分别切下。胶内酶解打质谱。

恩，因为是想连质谱测蛋白的精确分子量，不是想鉴定蛋白，所以好像不能跑SDS PAGE

16楼2014-06-06 16:26:12

swallow13

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17楼2014-06-07 09:32:09

lihuan0525

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fish_crying: 金币+1 2014-06-09 19:53:32

楼主试试G-15，G-25，G-50，G-75类似这种柱子吧，这种是低压层析柱，或许对你有帮助，但是这种柱子很贵。

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18楼2014-06-07 22:00:28

fish_crying

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18楼: Originally posted by lihuan0525 at 2014-06-07 22:00:28
楼主试试G-15，G-25，G-50，G-75类似这种柱子吧，这种是低压层析柱，或许对你有帮助，但是这种柱子很贵。

恩好我试试吧

19楼2014-06-09 19:53:52