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质粒是PCR产物,片段是磷酸化的,易自连,求连接体系中二者的比例,希望高手指点已有5人参与
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| 大家好,最近做连接转化,我想请教大家一个问题,我现在的质粒是1700 bp,自己构建的,PCR产物,两端都是-OH,不会自连;而插入的片段是大小不等的片段,大小在200-2000 bp,现在准备做连接,基于质粒不会自连,片段易自连,而且大小差距不大,我打算将载体浓度提高,为载体:目的片段=5:1和10:1,主要是想把载体质粒连接上去,不然全是片段的自连,不知道可行不?谢谢前辈指点 |
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5楼2014-06-04 14:11:31
杰-米尼
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