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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 请帮忙设计荧光定量PCR引物
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wyanyun

铁虫 (初入文坛)

[求助] 请帮忙设计荧光定量PCR引物 已有3人参与

因实验要求，需要设计一对专门针对人HPSE Transcript Variant 1（NM_006665.5）的特异性引物来做荧光定量PCR，可惜本人设计引物技术不佳，一直无法找到完全特异的引物，请各位出手相助，非常感谢！
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1楼 2014-06-03 10:53:43
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wangy0908

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wyanyun(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-06-11 18:55:06
利用beacon Designer软件设计吧，主要是你提供的目的序列特异不的，以及知道这段序列的结构吗？就是内含子和外显子区域，如果知道的话，就用两个外显子结合部进行设计的啊。这样得到的引物特异性会好一些的
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4楼2014-06-11 17:19:49
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by wyanyun at 2014-06-11 14:38:26
请各位帮忙！！

好设计，建议用primer-blast设计，好用

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2014-06-11 15:58:10
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wangweijian

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-06-12 13:03:45
可以用primer express 3 设计，软件应用简单，很快就能学会。beacon designer 应用比较复杂。
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5楼2014-06-11 21:41:38
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wyanyun

铁虫 (初入文坛)
这个基因有4个剪切体，我已经设计好了针对后三个的特异引物，但是就这个最长的转录本，怎么都设计不出来非常特异的，怎么都会同时扩增其他的某个剪切体。我个人还是非常熟悉这些设计软件的，但是就这个剪切体怎么都设计不出特异的来。
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6楼2014-06-12 14:30:34
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