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肖颖2009

铁虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by 成功源于想像 at 2014-06-03 18:16:37
转的293t,用的全式金脂转试剂!转的时候确实细胞状态不好,已经接近100%了才开始转染!!!...

额,293T是很好转染的。你转染的密度太大,肯定会影响转染效率的~ 一般70~80%的密度就可以转染了。细胞状态非常重要。可以尝试磷酸钙转染,网上的配方很多,可以试试~
11楼2014-06-04 13:49:38
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成功源于想像

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by yigeren8 at 2014-06-03 22:53:33
效率太低了,我们一般转染293T能达到90%以上吧,用lipo2000转染试剂,invitrogen公司的

恩,确实低,第一次做,接下来调整一下再做~~
12楼2014-06-04 16:26:51
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成功源于想像

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by yigeren8 at 2014-06-03 22:54:55
而且细胞达到70% 左右就可以转染了,密度太大反而不好

谢谢,试剂盒要求,70-90%,我的铺细胞的时候铺多了,第一天晚上弄好,第二天早上来都长到100%了,这个细胞长得太快了~~
13楼2014-06-04 16:27:43
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成功源于想像

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 肖颖2009 at 2014-06-04 13:49:38
额,293T是很好转染的。你转染的密度太大,肯定会影响转染效率的~ 一般70~80%的密度就可以转染了。细胞状态非常重要。可以尝试磷酸钙转染,网上的配方很多,可以试试~...

恩,已经买了碧云天的磷酸钙转染试剂,偷懒儿啦,不想自己配试剂~~自己配还得调PH值~~
14楼2014-06-04 16:51:21
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肖颖2009

铁虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
14楼: Originally posted by 成功源于想像 at 2014-06-04 16:51:21
恩,已经买了碧云天的磷酸钙转染试剂,偷懒儿啦,不想自己配试剂~~自己配还得调PH值~~...

哦,我原来也用过他们的试剂,转染效率还不错~ 80%左右。
15楼2014-06-05 10:18:39
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一步一步

木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
感觉效率不高。
细胞长满了再转回很影响转染效率的,一般在70%-80%转染会很好,留些空间,让转染的细胞进行一定的增值。
16楼2014-06-05 12:51:09
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