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diqilvyinyun

银虫 (初入文坛)

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虫号: 1845424
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性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能

[求助] 重组质粒转入BL21后，平板可以长，但挑单克隆菌摇不起来已有11人参与

多次尝试，不是挑没挑上的问题，不是抗生素的问题，不是培养基的问题；
也曾做实验，同一管子里的菌取一些用于摇菌，取一些涂平板，过夜培养，平板长菌，试管菌还是没有要起来；
过夜摇菌后培养基呈类似悬浊液，图片如下：
求大神指教，还有是否有人也遇到过类似情况，望指点一二，以助小弟走出困境。

IMG_2850.JPG

IMG_2852.JPG

左边为无菌培养基，右边为过夜摇菌后的菌液；

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为梦想而努力！

1楼 2014-06-02 08:45:42

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追逐盛夏

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 3051509
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专业: 合成药物化学

引用回帖:

16楼: Originally posted by dulei at 2014-06-04 09:31:37
确定是噬菌体污染。
噬菌体对于平板上的菌影响不大，但是对于液体的菌影响比较大，过夜培养就呈现你这种状况的悬浊液，那是菌体裂解了，如果观察仔细，会发现，被噬菌体污染的菌，先长到一定浓度，然后裂解成菌体聚 ...

您好：
我最近摇菌就经常出现这种情况，从平板挑好几个单克隆，第二天长得很浑浊的直接试管接大瓶，但是基本上是浑浊了又变清了或者好久好久8-9小时才会变浑浊，这是噬菌体污染了吗？我尝试质粒重新转化后切胶纯化的DNA转BL21也试过不同公司的BL21都有问题，我该怎么解决呢？我在想是我哪一步出错了呢？最近我的蛋白都是没有一个能够摇起来。谢谢了，求指教！