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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » WB上样时，样品稀释问题
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jianglay

新虫 (初入文坛)

[求助] WB上样时，样品稀释问题已有5人参与

我用WB测的是细胞内蛋白的表达，细胞裂解后不同样品的蛋白量不一致，我现在要调节到一致，是用细胞裂解液稀释（不加PMSF可以吗？）还是上样缓冲液稀释呢？
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喔列打击哇刚大木达
1楼2014-05-29 11:02:44
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sunrq516516

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用裂解液，要加各种inhibitor。其实我会告诉你我们实验室现在都开始用蒸馏水稀释了吗。。。。
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Permanent head Damage
4楼2014-05-30 12:23:53
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-05-30 11:34:36
先用裂解液补加到体积最大那个体积   然后加入等量上样缓冲液稀释
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2楼2014-05-29 14:56:13
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-05-30 11:35:08
用裂解液或者PBS稀释
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3楼2014-05-30 11:13:38
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songful

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

听同学说，如果样品用蒸馏水进行稀释，跑电泳时的缓冲液也是用蒸馏水配制的，这样，样品加到点样孔里，其实样品就相当于没稀释了。同学，你觉得呢
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5楼2015-11-18 08:56:13
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