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jianglay

新虫 (初入文坛)

[求助] WB上样时,样品稀释问题 已有5人参与

我用WB测的是细胞内蛋白的表达,细胞裂解后不同样品的蛋白量不一致,我现在要调节到一致,是用细胞裂解液稀释(不加PMSF可以吗?)还是上样缓冲液稀释呢?
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linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

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★ ★
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youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2014-05-30 11:34:36
先用裂解液补加到体积最大那个体积   然后加入等量上样缓冲液稀释
2楼2014-05-29 14:56:13
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
youlinglyw: 金币+2, 赠人玫瑰手有余香,生物科学有你更精彩! 2014-05-30 11:35:08
用裂解液或者PBS稀释
3楼2014-05-30 11:13:38
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sunrq516516

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用裂解液,要加各种inhibitor。其实我会告诉你我们实验室现在都开始用蒸馏水稀释了吗。。。。
Permanent head Damage
4楼2014-05-30 12:23:53
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songful

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

听同学说,如果样品用蒸馏水进行稀释,跑电泳时的缓冲液也是用蒸馏水配制的,这样,样品加到点样孔里,其实样品就相当于没稀释了。同学,你觉得呢
5楼2015-11-18 08:56:13
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biocherry

铁虫 (正式写手)

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你好,你细胞表达的蛋白含量多少你怎么知道的呢?

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6楼2015-11-22 13:23:48
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biocherry

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你的实验目的是测到底表达蛋白没有吗?

发自小木虫Android客户端
7楼2015-11-22 13:24:35
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