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demonsboy

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 818564
注册: 2009-07-30
专业: 临床检验新技术

[求助] 求助酶联免疫的问题已有5人参与

本人在做一种双抗体夹心法试剂盒，评估一对抗体时，采用抗体直接包板捕捉抗原显示，两种配对抗体可用，而借助亲和素包板，吸附生物素标记抗体，尔后再检测抗原时，这对抗体检测临床抗原效果却特别不理想，请问在这种情况下，调节反应缓冲液，可以解决问题吗，还是这对抗体本身不适合于亲和素间接包板，求大侠支招

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1楼2014-05-28 08:46:25

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小王2

新虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
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虫号: 3041829
注册: 2014-03-12

【答案】应助回帖

大概知道你们做的系统是啥样子的估计都是亲和素的板，第一步都是加生物素化的抗原抗体进去。检测临床样本不理想，具体是个什么情况？1. 有可能生物素化影响了抗体的活性，标记到了抗体的CDR区对抗原抗体结合形成了空间位阻。2.生物素化是随机与抗体的某些游离基团结合，可能结合到抗体的Fc端也可能结合到两个结合臂。所以被亲和素捕获后可能结合臂暴露在外可能Fc暴露在外。这也会造成与直接包被反应性的不一致。3. 亲和素的板是否封闭完全也会影响结果。所以还是得根据你的结果调整。有些是可以根据调整缓冲液啥的可以调回来的。有些未必。

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7楼2015-05-12 10:08:29

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