24小时热门版块排行榜    

查看: 1949  |  回复: 7

梦的彩虹

金虫 (正式写手)

[求助] 5’RACE结果对不上,求帮助,必有重谢!! 已有2人参与

今天看了5’RACE结果,试剂盒引物和特异性引物都找到了,但是片段中特异性引物之前的那一段的一部分和5‘RACE中的序列对应的位置不符合是怎么回事?如何测序的峰形很好的话,有没有测错的可能。请大神帮忙啊........急死了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

快乐农夫

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
梦的彩虹(kx444555代发): 金币+1, 鼓励交流 2014-05-23 15:54:38
基因组DNA污染吧,做负对照了吗?
2楼2014-05-22 21:52:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦的彩虹

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 快乐农夫 at 2014-05-22 21:52:37
基因组DNA污染吧,做负对照了吗?

怎么做负对照?
3楼2014-05-23 10:11:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

快乐农夫

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
梦的彩虹(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励热心回帖交流 2014-05-23 17:12:08
引用回帖:
3楼: Originally posted by 梦的彩虹 at 2014-05-23 10:11:40
怎么做负对照?...

连接Adaptor之后进行反转录时不加MLV,直接反转录,用反转录产物扩目的片段,如果还能扩出来,就是基因组DNA污染,这里的MLV是由RNA反转录成cDNA时必须的一个东西,根据试剂盒的不同也可是其他的,关键就是破坏反转录反应的正常进行,如果没有污染,扩不出目的条带才对
4楼2014-05-23 16:45:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
梦的彩虹: 金币+2, 有帮助 2014-05-28 15:52:44
遇到这种情况,还犹豫什么,直接重新做,假阳性出现是很正常的,如果还有这样的情况,重新设计特异引物

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-05-23 17:29:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦的彩虹

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-05-23 17:29:06
遇到这种情况,还犹豫什么,直接重新做,假阳性出现是很正常的,如果还有这样的情况,重新设计特异引物

测出的的几个样品都是这种情况,这怎么解释?
6楼2014-05-28 15:53:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuchange918

木虫 (正式写手)

RACE时PCR是否有非特异条带?是否是在预期片段大小附近回收的产物?
7楼2014-05-29 08:08:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦的彩虹

金虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by fuchange918 at 2014-05-29 08:08:26
RACE时PCR是否有非特异条带?是否是在预期片段大小附近回收的产物?

没有,跑胶后只有一个拖尾带,没有特异性条带,而且条带特别浅。
8楼2014-05-29 10:48:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 梦的彩虹 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 青基如何破局 +3 lyz123lyz 2026-08-27 4/200 2026-08-27 13:08 by kulium
[基金申请] 基金未中,这种答复是模板吗? +4 zhaosm1982 2026-08-27 5/250 2026-08-27 12:17 by zhaosm1982
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +15 爱看书的可乐 2026-08-26 17/850 2026-08-27 11:29 by xxniao123
[文学芳草园] 梦想 +3 myrtle 2026-08-26 3/150 2026-08-27 10:01 by angelyueyi
[基金申请] 面上合作单位盖章 +3 ssyjh 2026-08-27 3/150 2026-08-27 09:59 by 阿拉贡aragon
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +4 a089 2026-08-26 5/250 2026-08-27 09:24 by Howard28
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 04:33 by Ie9AyIAvGbvs
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 系统查不到 +10 董八千 2026-08-26 10/500 2026-08-26 16:30 by Equinoxhua
[基金申请] 怎么查啊 +5 huang1991js 2026-08-26 5/250 2026-08-26 16:09 by Equinoxhua
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +22 羊腰板 2026-08-21 25/1250 2026-08-26 15:00 by zuocuiping
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 科研孤儿太难了 +21 我4大白菜 2026-08-20 22/1100 2026-08-26 11:29 by nlgza
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑,不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
信息提示
请填处理意见