24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1789  |  回复: 7

梦的彩虹

金虫 (正式写手)

[求助] 5’RACE结果对不上,求帮助,必有重谢!! 已有2人参与

今天看了5’RACE结果,试剂盒引物和特异性引物都找到了,但是片段中特异性引物之前的那一段的一部分和5‘RACE中的序列对应的位置不符合是怎么回事?如何测序的峰形很好的话,有没有测错的可能。请大神帮忙啊........急死了。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

快乐农夫

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
梦的彩虹(kx444555代发): 金币+1, 鼓励交流 2014-05-23 15:54:38
基因组DNA污染吧,做负对照了吗?
2楼2014-05-22 21:52:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦的彩虹

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 快乐农夫 at 2014-05-22 21:52:37
基因组DNA污染吧,做负对照了吗?

怎么做负对照?
3楼2014-05-23 10:11:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

快乐农夫

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
梦的彩虹(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励热心回帖交流 2014-05-23 17:12:08
引用回帖:
3楼: Originally posted by 梦的彩虹 at 2014-05-23 10:11:40
怎么做负对照?...

连接Adaptor之后进行反转录时不加MLV,直接反转录,用反转录产物扩目的片段,如果还能扩出来,就是基因组DNA污染,这里的MLV是由RNA反转录成cDNA时必须的一个东西,根据试剂盒的不同也可是其他的,关键就是破坏反转录反应的正常进行,如果没有污染,扩不出目的条带才对
4楼2014-05-23 16:45:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
梦的彩虹: 金币+2, 有帮助 2014-05-28 15:52:44
遇到这种情况,还犹豫什么,直接重新做,假阳性出现是很正常的,如果还有这样的情况,重新设计特异引物

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-05-23 17:29:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦的彩虹

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-05-23 17:29:06
遇到这种情况,还犹豫什么,直接重新做,假阳性出现是很正常的,如果还有这样的情况,重新设计特异引物

测出的的几个样品都是这种情况,这怎么解释?
6楼2014-05-28 15:53:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuchange918

木虫 (正式写手)

RACE时PCR是否有非特异条带?是否是在预期片段大小附近回收的产物?
7楼2014-05-29 08:08:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦的彩虹

金虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by fuchange918 at 2014-05-29 08:08:26
RACE时PCR是否有非特异条带?是否是在预期片段大小附近回收的产物?

没有,跑胶后只有一个拖尾带,没有特异性条带,而且条带特别浅。
8楼2014-05-29 10:48:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 梦的彩虹 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 315求调剂 +9 欣喜777 2026-04-04 10/500 2026-04-05 10:58 by xiayan13521
[考研] 311分 22408 求调剂 +3 bing_bot 2026-04-03 3/150 2026-04-05 00:43 by chongya
[考研] 能动调剂326专硕 +4 wan112233 2026-04-04 4/200 2026-04-04 22:47 by yu221
[考研] 283求调剂 +4 mcbbc 2026-04-03 5/250 2026-04-04 20:51 by imissbao
[考研] 385分 生物学(071000)求调剂 +9 qf626 2026-04-01 9/450 2026-04-04 18:10 by macy2011
[考研] 考研调剂 +4 美丽的youth_ 2026-04-04 5/250 2026-04-04 17:16 by imissbao
[考研] 材料专业383求调剂 +8 郭阳阳阳成 2026-04-03 8/400 2026-04-04 10:29 by Rednal.
[考研] 297求调剂 +11 ljy20040718! 2026-04-03 13/650 2026-04-04 09:23 by 来看流星雨10
[考研] 材料295 +13 小英11 2026-04-03 14/700 2026-04-04 09:02 by 来看流星雨10
[考研] 281求调剂 +10 aaawhy 2026-04-03 10/500 2026-04-03 21:42 by lbsjt
[考研] 372分材料与化工(085600)一志愿湖南大学求调剂 +3 蓝笺片 2026-04-03 4/200 2026-04-03 17:58 by Jimmyandyou
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-04-03 5/250 2026-04-03 15:06 by arrow8852
[考研] 273求调剂 +20 李芷新1 2026-03-31 20/1000 2026-04-03 09:58 by linyelide
[考研] 262求调剂 +6 励志一定发文章 2026-04-02 7/350 2026-04-03 09:54 by linyelide
[考研] 调剂 +3 osbbx 2026-04-02 3/150 2026-04-03 07:47 by cc8418
[考研] 调剂 +3 好好读书。 2026-04-01 6/300 2026-04-02 15:49 by liumengping
[考研] 一志愿北京科技大学085601材料工程英一数二初试总分335求调剂 +8 双马尾痞老板2 2026-04-02 9/450 2026-04-02 14:45 by 5896
[考研] 270调剂 +7 maxjxbsk 2026-04-02 7/350 2026-04-02 09:50 by yulian1987
[考研] 303分 0807学硕求调剂 +3 TYC3632 2026-04-01 3/150 2026-04-01 19:24 by lwk2004
[考研] 274求调剂 +6 xiao爱同学 2026-03-30 6/300 2026-03-31 10:04 by cal0306
信息提示
请填处理意见