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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 关于293T细胞的问题，急求助
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)
引用回帖:
26楼: Originally posted by aloha at 2014-05-26 15:03:57
293T传代的时候不能太稀，否侧生长不起来；293T细胞不能生长过度，一旦过度就不要了，重新复苏冻藏的！；生长过长，培养基变黄，细胞非常容易漂，严格48h传代!

你好，我今天上午传了下细胞，晚上来看时有些成块儿的黑色东西，看起来是细胞团在一起，想问下你们出现过这种情况吗？是污染吗
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31楼2014-06-08 21:08:03
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BioChen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

293细胞很好养的，转染效率高。养细胞不要偷懒，天天观察细胞，48小时之内，换液或者传代。
293细胞国产的NBCS（新生牛血清）就好了，进口FBS（胎牛血清）反而长的太快，不好控制。
牛逼实验室只有高级血清的，建议把血清量减少，减到细胞生长速度你满意为至。
293细胞贴壁性确实不好，操作时不要直接对着细胞，加液吸液从壁上，就没事。
怕自己手贱做不好，买点多聚赖氨酸，操作方法百度，可以提高293细胞的贴壁。
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32楼2014-06-08 21:20:08
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)
引用回帖:
32楼: Originally posted by BioChen at 2014-06-08 21:20:08
293细胞很好养的，转染效率高。养细胞不要偷懒，天天观察细胞，48小时之内，换液或者传代。
293细胞国产的NBCS（新生牛血清）就好了，进口FBS（胎牛血清）反而长的太快，不好控制。
牛逼实验室只有高级血清的，建 ...

嗯，谢谢回帖，我以前这个问题解决了，现在遇到新问题了，今天上午传了细胞以后，晚上来看发现有的细胞成团且变成黑色了，有的细胞部分变黑，想问是不是污染了？没遇到这个问题
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33楼2014-06-08 21:29:32
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DAX1

新虫 (小有名气)
引用回帖:
30楼: Originally posted by 泡菜肉丝 at 2014-06-08 21:06:45
你好，我今天上午传了下细胞，晚上来看时有些成块儿的黑色东西，看起来是细胞团在一起，想问下你们出现过这种情况吗？是污染吗...

是不是细胞应该很容易分辨吧？上午分的，下午细胞应该不会成团，分裂没那么快，而且293也没那么容易成团。
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34楼2014-06-10 15:12:14
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)
引用回帖:
34楼: Originally posted by DAX1 at 2014-06-10 15:12:14
是不是细胞应该很容易分辨吧？上午分的，下午细胞应该不会成团，分裂没那么快，而且293也没那么容易成团。...

是细胞团在一起的，关键是中间部分完全成黑色的了，我的细胞感觉很容易成团，尤其做转染时候，24小时后观察还可以，48小时后几乎全部连在一起了，很少有单个的。
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35楼2014-06-10 21:36:13
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shilei916511

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

培养基太酸了，建议多加点培养基或着换液时间变短。鉴定有没有染菌有用LB培养基摇下，很快会有结果。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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我懂我的偏执，默不作声或冷漠是我最大的容忍。
36楼2014-06-13 17:16:27
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)
引用回帖:
36楼: Originally posted by shilei916511 at 2014-06-13 17:16:27
培养基太酸了，建议多加点培养基或着换液时间变短。鉴定有没有染菌有用LB培养基摇下，很快会有结果。

嗯嗯，有道理，谢谢
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37楼2014-06-13 20:01:02
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yipan

铜虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
silicare: 金币-20, 屏蔽内容, 违规存档 2014-07-08 12:31:24
本帖内容被屏蔽
38楼2014-07-07 16:33:11
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风信子寻梦

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

几乎全飘起来，培养基变黄、且不浑浊，如没有其他现象，个人认为是培养液营养耗尽，细胞得不到营养死了，楼主应该及时换液，或者长满了的话就得及时传代或冻存。
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39楼2014-07-15 13:45:54
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)
引用回帖:
39楼: Originally posted by 风信子寻梦 at 2014-07-15 13:45:54
几乎全飘起来，培养基变黄、且不浑浊，如没有其他现象，个人认为是培养液营养耗尽，细胞得不到营养死了，楼主应该及时换液，或者长满了的话就得及时传代或冻存。

嗯，确实是呢 ，刚开始培养不懂，只担心是不是污染了 ，现在明白了，多谢
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40楼2014-07-21 10:34:41
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