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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)

引用回帖:
26楼: Originally posted by aloha at 2014-05-26 15:03:57
293T传代的时候不能太稀,否侧生长不起来;293T细胞不能生长过度,一旦过度就不要了,重新复苏冻藏的!;生长过长,培养基变黄,细胞非常容易漂,严格48h传代!

你好,我今天上午传了下细胞,晚上来看时有些成块儿的黑色东西,看起来是细胞团在一起,想问下你们出现过这种情况吗?是污染吗
31楼2014-06-08 21:08:03
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BioChen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

293细胞很好养的,转染效率高。养细胞不要偷懒,天天观察细胞,48小时之内,换液或者传代。
293细胞国产的NBCS(新生牛血清)就好了,进口FBS(胎牛血清)反而长的太快,不好控制。
牛逼实验室只有高级血清的,建议把血清量减少,减到细胞生长速度你满意为至。
293细胞贴壁性确实不好,操作时不要直接对着细胞,加液吸液从壁上,就没事。
怕自己手贱做不好,买点多聚赖氨酸,操作方法百度,可以提高293细胞的贴壁。
32楼2014-06-08 21:20:08
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)

引用回帖:
32楼: Originally posted by BioChen at 2014-06-08 21:20:08
293细胞很好养的,转染效率高。养细胞不要偷懒,天天观察细胞,48小时之内,换液或者传代。
293细胞国产的NBCS(新生牛血清)就好了,进口FBS(胎牛血清)反而长的太快,不好控制。
牛逼实验室只有高级血清的,建 ...

嗯,谢谢回帖,我以前这个问题解决了,现在遇到新问题了,今天上午传了细胞以后,晚上来看发现有的细胞成团且变成黑色了,有的细胞部分变黑,想问是不是污染了?没遇到这个问题
33楼2014-06-08 21:29:32
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DAX1

新虫 (小有名气)

引用回帖:
30楼: Originally posted by 泡菜肉丝 at 2014-06-08 21:06:45
你好,我今天上午传了下细胞,晚上来看时有些成块儿的黑色东西,看起来是细胞团在一起,想问下你们出现过这种情况吗?是污染吗...

是不是细胞应该很容易分辨吧?上午分的,下午细胞应该不会成团,分裂没那么快,而且293也没那么容易成团。
34楼2014-06-10 15:12:14
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)

引用回帖:
34楼: Originally posted by DAX1 at 2014-06-10 15:12:14
是不是细胞应该很容易分辨吧?上午分的,下午细胞应该不会成团,分裂没那么快,而且293也没那么容易成团。...

是细胞团在一起的,关键是中间部分完全成黑色的了,我的细胞感觉很容易成团,尤其做转染时候,24小时后观察还可以,48小时后几乎全部连在一起了,很少有单个的。
35楼2014-06-10 21:36:13
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shilei916511

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

培养基太酸了,建议多加点培养基或着换液时间变短。鉴定有没有染菌有用LB培养基摇下,很快会有结果。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
我懂我的偏执,默不作声或冷漠是我最大的容忍。
36楼2014-06-13 17:16:27
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)

引用回帖:
36楼: Originally posted by shilei916511 at 2014-06-13 17:16:27
培养基太酸了,建议多加点培养基或着换液时间变短。鉴定有没有染菌有用LB培养基摇下,很快会有结果。

嗯嗯,有道理,谢谢
37楼2014-06-13 20:01:02
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yipan

铜虫 (职业作家)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
silicare: 金币-20, 屏蔽内容, 违规存档 2014-07-08 12:31:24
本帖内容被屏蔽

38楼2014-07-07 16:33:11
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风信子寻梦

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

几乎全飘起来,培养基变黄、且不浑浊,如没有其他现象,个人认为是培养液营养耗尽,细胞得不到营养死了,楼主应该及时换液,或者长满了的话就得及时传代或冻存。
39楼2014-07-15 13:45:54
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)

引用回帖:
39楼: Originally posted by 风信子寻梦 at 2014-07-15 13:45:54
几乎全飘起来,培养基变黄、且不浑浊,如没有其他现象,个人认为是培养液营养耗尽,细胞得不到营养死了,楼主应该及时换液,或者长满了的话就得及时传代或冻存。

嗯,确实是呢 ,刚开始培养不懂,只担心是不是污染了 ,现在明白了,多谢
40楼2014-07-21 10:34:41
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