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foxcl

铁虫 (正式写手)

[求助] 反相色谱 平稳段(洗出段)梯度峰如下降低或消除? 已有5人参与

色谱条件
缓冲液:3.12 磷酸二氢钠→1000mL水中,磷酸调pH至3.0
流动相A:BP:乙腈=1:9
流动相B:BP:乙腈=3:7
检测波长:210nm
进样量:10uL
柱温:25度
梯度如下图1、有机相比例如下图2、结果如下图3:

反相色谱 平稳段(洗出段)梯度峰如下降低或消除?
1400554632621.jpg


反相色谱 平稳段(洗出段)梯度峰如下降低或消除?-1
1400554540833.jpg


反相色谱 平稳段(洗出段)梯度峰如下降低或消除?-2
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voyager88

金虫 (著名写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by foxcl at 2014-05-20 14:18:18
是的,只要有机相比例达到一定程度,必然会出来的...

我说你70min 从70%不要瞬间将至30%,缓慢下降末尾那个峰(RT=74MIN)就没了,和你前面出不出峰有什么关系?况且前面那些可能是杂峰,不是梯度峰好不好?那些杂峰可能是你磷酸盐、乙腈、和水纯度不够导致的,210mn,很多东西都有末端吸收,东西不纯,色谱柱冲不干净出杂峰在所难免。
微信公众号:Pharmaguider(药事纵横),主页:www.pharmaguider.cn
9楼2014-05-20 14:25:38
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voyager88

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
foxcl(News代发): 金币+1, 感谢回帖交流 2014-05-22 23:57:45
你梯度下降时不要瞬间拉回基点,用5min缓慢降至基点可能会好些,磷酸盐尽量使用色谱纯或者优级纯的,也会好些
微信公众号:Pharmaguider(药事纵横),主页:www.pharmaguider.cn
2楼2014-05-20 11:52:08
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foxcl

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by voyager88 at 2014-05-20 11:52:08
你梯度下降时不要瞬间拉回基点,用5min缓慢降至基点可能会好些,磷酸盐尽量使用色谱纯或者优级纯的,也会好些

磷酸盐我们这边只有分析纯
回基点其实可以缓和些,但是冲洗段的杂质怎么办?
3楼2014-05-20 13:24:01
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foxcl

铁虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by voyager88 at 2014-05-20 11:52:08
你梯度下降时不要瞬间拉回基点,用5min缓慢降至基点可能会好些,磷酸盐尽量使用色谱纯或者优级纯的,也会好些

用150mm的短柱是不是可能会好些?
4楼2014-05-20 13:24:34
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