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万丽丽081222

银虫 (初入文坛)

[求助] PCR 已有2人参与

这是引物二聚体吗?我的引物是根据保守序列设计的简并引物,特异性不强。目的条带的大小也不知道。

PCR
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learnenglish
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爱睡猪

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助! 2014-05-20 09:21:36
看起来不像,你设置一个空白对照就清楚了
ControlMyself
2楼2014-05-19 15:34:48
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再来一次

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你一对引物里同源互补序列多吗,就是互补它的大小对吗,二聚体超亮的,你的这个亮度跟mark相近,不太像。
3楼2014-05-21 14:28:11
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万丽丽081222

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 再来一次 at 2014-05-21 14:28:11
你一对引物里同源互补序列多吗,就是互补它的大小对吗,二聚体超亮的,你的这个亮度跟mark相近,不太像。

后来我又在不加模板的情况下作了一次PCR,结果证明是二聚体
learnenglish
4楼2014-05-21 20:20:51
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

一看就是二聚体。。。
5楼2014-05-21 22:52:47
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万丽丽081222

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by dllchina at 2014-05-21 22:52:47
一看就是二聚体。。。

为什么呀?不是说引物二聚体大小在100bp一下嘛
learnenglish
6楼2014-05-22 10:25:50
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再来一次

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 万丽丽081222 at 2014-05-21 20:20:51
后来我又在不加模板的情况下作了一次PCR,结果证明是二聚体...

重新设计引物吧,可能同源性太高了。要不就先加一个引物,跑三轮后再加另一个引物!
7楼2014-05-22 22:34:37
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

你用的GELRED染料么?看着很像,那个燃料拖带,差个几百BP很正常
8楼2014-05-22 23:54:32
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