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静mo2010

银虫 (正式写手)

应助: 2 (幼儿园)
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[求助] 单克隆长不出来啊。。求助大神！已有1人参与

我做双酶切，EcoRI和PstI，载体有7.3kb，第一次做的时候，缓冲液是EcoRI专用的buffer20微升的体系载体0.5微克，内切酶分别是1微升，切过夜，目的片段也是一样。第二次做的时候，载体切8h，目的片段克隆一点都没有长，可以排除的因素有：抗生素平板没问题，转化操作没问题，感受态没问题，酶切后胶回收没问题。但是酶切过程我不能确定有没有问题，因为跑出来的片段，有的时候会有好几条，但是只有一条的酶切产物的时候也没有做出来。。。

单克隆长不出来啊。。求助大神！

EcoRI&PstI双酶切载体pgbkt7-5.10(1).jpg

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踮起脚尖、就更靠近阳光

1楼 2014-05-19 10:32:57

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kingoff999

铁虫 (初入文坛)

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专业: 食品科学基础

【答案】应助回帖

星号活性原因？所以你回收的不是目的片段？

2楼2014-05-26 09:18:47

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