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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 麻烦大家帮我分析一下TLC是怎么回事
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liudaochuang

金虫 (小有名气)

[交流] 麻烦大家帮我分析一下TLC是怎么回事

微生物发酵液在pH3.0用乙酸乙酯萃取后上薄层，下面是我的TLC图，展开条件是石油醚：乙酸乙酯＝2：1，GF254板，荧光图上的黑色长带都是活性物质，为什么会爬的那么弥散，点样孔处有一批东西基本没有展开（可以排除过载），试了很多展开体系和条件都是这样（目标物质是未知物，只知道是芳香类），请问大家，这样的图是正常的吗？有哪类物质可能出现这样的TLC图？能够全面回答我的问题的赠送3-5个金币。

[ Last edited by liudaochuang on 2008-3-15 at 10:03 ]
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1楼 2008-03-15 09:11:00
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无双国士

至尊木虫 (著名写手)
微生物发酵液跑薄层板出这样的结果很正常。
因为发酵液里面估计不止是单一的化合物，和纯净物跑薄层板不一样。
假如你知道你的发酵液是单一的物质，那你的展开剂组成比例还需要优化。
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拔毛的凤凰真的不如个鸡吧？
2楼2008-03-15 12:39:05
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aoying2008

木虫 (著名写手)
★
liudaochuang(金币+1,VIP+0):谢谢
根据TLC图谱来看，可能有以下些原因：
1.展开剂可能还需进一步调整，以便使产物分开；
2.点样浓度可能过高；可以适当减少点样量；
3.出现拖尾现象，可以在展开剂中加入一定冰乙酸；
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3楼2008-03-16 21:13:30
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flyaway2007

混合物 那就正常了，先纯化
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4楼2008-03-17 01:05:52
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mouse103

专家顾问 (著名写手)

关于TLC

★ ★ ★
liudaochuang(金币+3,VIP+0):谢谢
你出现的问题可从两个方面考虑
1. 溶剂的比例不好，或者溶剂的选择不好，可试用不同展开体系及配比
2. 你的产物结构影响，含有羧基或氨基或羟基多，如果是羧基你可以在展开体系中加入一定量的甲酸（约1％），如果是氨基你可以加入一定量的氨水或三乙胺（约1％），如果是羟基多可以加一定量的甲醇。
希望对你有一定的帮助。
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5楼2008-03-17 12:55:38
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golkey

铁虫 (正式写手)
我觉得你的展开剂没找好
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6楼2008-03-18 12:16:43
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鱼儿是我310

我也觉得展开剂不是很好　根本就没跑动
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7楼2008-03-18 21:22:44
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dkxgfh

金虫 (小有名气)
赞同mouse103的说法，我做过酚酸类化合物的TLC，也是相同的结果，加酸调PH值能得到改善，或者用聚酰胺或反相
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8楼2008-03-19 09:09:15
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wenlanzi806

金虫 (小有名气)
应该加大展开剂的强度使Rf值在0.17~0.65之间
从板上看展开剂好象没选好
其次在酸液中提取可考虑mouse103的做法
再次就是点样的力度太大
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9楼2008-03-19 10:34:44
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liudaochuang

金虫 (小有名气)

感谢大家的帮助，改了条件，现在好多了

感谢大家的帮助，改了条件，现在好多了，TLC条件是氯仿：甲醇：甲酸＝100：20：1  应该还有改善的余地，请大家不吝赐教啊！！！

[ Last edited by liudaochuang on 2008-3-21 at 21:12 ]
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10楼2008-03-21 21:08:42
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