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心月之星

新虫 (初入文坛)

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[求助] 植物DNA 的提取与纯化已有1人参与

DNA粗提取后有很明显的条带,纯化后看不到条带,为什么是不是说明原来DNA溶液中全是蛋白质和杂质

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1楼 2014-05-15 09:08:30

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qianhaocool

新虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
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gyesang: 金币+4, 鼓励回帖交流！ 2014-05-15 16:38:24

1、粗提，可能你是用的经典酚氯仿法吧。不知道你有没有加蛋白酶K，以及抽提次数，以及DNA析出的时候用的是乙醇有没有加异丙醇。
2、纯化是用的试剂盒么，还是二次沉淀？
3、如果是试剂盒的话，它对大片段的吸附能力以及洗脱能力是有限的，一般都是些短片段。粗提的DNa分子量一般都比较打，所以可能你用试剂盒纯化后的量比较少。当然还跟你的操作和盒子有关系，比如温度选择，洗脱次数等。
4、如果你是二次沉淀。不排除你提出来的DNA很大部分是蛋白质。如果加水溶解后黏糊糊的甚至是胶状，恭喜你，提出来的全是多糖。
5、顺便说一句，提多糖的方法和提DNa的酚氯仿法基本是一样的。

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