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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 质粒线性化有点问题了，求教！！！
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bellezmy

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒线性化有点问题了，求教！！！已有5人参与

本人用的是pGAPZαA质粒，已经重组完成，线性化选择Bsp HI酶切位点，但是酶切过后产生两条带，条件是37度，40min，如图所示：

质粒线性化有点问题了，求教！！！
2014-04-29.jpg
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1楼2014-05-12 14:42:40
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by luwei13566 at 2014-05-12 19:38:27
快切酶5分钟能切开，如果是普通的酶就不一定啦。多切一会只要是一条带就没问题...

试过了，快切酶只是个噱头，普通的酶照样也切的很快

[ 发自小木虫客户端 ]
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8楼2014-05-12 19:56:07
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查看全部 9 个回答

for5

木虫 (正式写手)
是单切位点么?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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操蛋的XX
2楼2014-05-12 14:51:40
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
bellezmy(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-12 17:55:04
感觉你个质粒像是没有切开，前面的条带是超螺旋质粒
赞一下 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2014-05-12 15:03:41
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luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
bellezmy(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-12 17:55:14
同意LS的说法，做一个切割时间梯度，切30min 1h  2h 都做一次~
赞一下 回复此楼
大家相互帮助哈
4楼2014-05-12 16:59:57
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