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新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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louis_cheung: 金币+4, 有帮助 2014-05-13 20:43:26
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-05-14 22:13:11
EcoR 1和Xba 1在原理上做酶切反应是用不同的buffer,但THERMO公司的快切酶的buffer是通用的,其他公司的不是通用的,你可以看看你的。
我之前也有过这种现象,我和我实验室的同学一起用的这两个酶,他可以切开我切不开,虽然我不知道实质的原因是什么,但是我觉的是跟你本身的基因和引物有关,我后来换了酶切位点,重新设置了引物就没有这个问题了。
17楼2014-05-13 19:24:29
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新虫 (初入文坛)

引用回帖:
20楼: Originally posted by louis_cheung at 2014-05-13 20:45:55
EcoR 1和Xba 1用的是takara的,buffer 是其双酶切buffer表格里推荐的~...

Takara的这两个酶用的是不同的buffer,一个是高盐一个是低盐的,你自己看一下。我试过一个酶切、胶回收再酶切第二个,不过效果不好,还是不行,所以我建议你先重设引物,等引物要好几天,你再试试单酶切再单酶切
23楼2014-05-14 09:51:00
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