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jurongv

新虫 (初入文坛)

[求助] Exonuclease Ⅲ 可以用来切RNA 得到guanosine 5'-monophosphate吗

老板要我买一个可以用来切RNA得到有鲜味的guanosine 5'-monophosphate的核酸外切酶,我是学纯化学的孩子好么...生物的东西真心不记得了,求各位前辈指教:我现在找到一个Exonuclease Ⅲ (E. coli ),他们网站上的介绍是3'到5'的顺序,但是我不太明白这个顺序切出来是5'的核苷酸吗 (必须要留下5'的才可以,切反了我就完蛋了,花上千块买了没用的药品肯定被骂死...当然老板自己好像也不是很确定,我问他的时候他就叫我查文献make sure,我也没找到文献嘤嘤...)
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1楼 2014-05-12 10:50:45
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jurongv

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-05-12 22:09:46
你去搞点食品添加剂，呈味核苷酸二钠，那个里面主要就是GMP和IMP，都不用切了，直接分离GMP就好啦？
我觉得GMP应该直接也有卖的！

我就是要在发酵过的渣里面提核苷酸,类似废物利用这样
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5楼2014-05-13 17:07:05
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-05-13 08:26:54
jurongv: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-05-13 17:07:59
你这个根本不需要用酶切~~~
RNA用碱水解之后，产生的就是5‘-monophosphate，2‘/3’ hydroxyl 的NMP产物，你只需要再用HPLC之类的方法纯化GMP即可。
据我所知，目前商业化的exonuclease，还没有针对RNA的。
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2楼2014-05-12 22:04:15
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-05-13 08:26:57
你去搞点食品添加剂，呈味核苷酸二钠，那个里面主要就是GMP和IMP，都不用切了，直接分离GMP就好啦？
我觉得GMP应该直接也有卖的！
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3楼2014-05-12 22:09:46
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jurongv

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by biostar2009 at 2014-05-12 22:04:15
你这个根本不需要用酶切~~~
RNA用碱水解之后，产生的就是5‘-monophosphate，2‘/3’ hydroxyl 的NMP产物，你只需要再用HPLC之类的方法纯化GMP即可。
据我所知，目前商业化的exonuclease，还没有针对RNA的。

太谢谢了~可以给具体一点的条件么,我看到碱水解的话不好控制程度啊,会变成核糖\碱基\磷酸这样呢
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4楼2014-05-13 17:06:10
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