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圣林2

银虫 (初入文坛)

[求助] 纤维蛋白平板法测纳豆激酶活性,为什么出不来溶解圈呢? 已有1人参与

真心求教大神:
        用纤维蛋白平板法测纳豆激酶活性,蚓激酶做标准曲线,但是一直出不来溶解圈,不知什么原因。
因为本人是初次做这方面的实验,缺乏经验,配方是按照论文查找的:
        1.牛纤维蛋白原溶解于pH7.4磷酸盐缓冲液,制成0.89mg/ml溶液;牛凝血酶溶解于pH7.4磷酸盐缓
冲液中,制成7.5单位/ml的溶液;
        2.取1%琼脂糖20ml,水浴50°C15min以上,然后将牛纤维蛋白15ml在50℃水浴中恒温15min,两者温度一致时将凝血酶
1ml和牛纤维蛋白原15ml与琼脂糖溶液迅速混合倒平板。
         所用点样的蚓激酶溶液浓度梯度位于400-2000单位/ml,应当指出的是我在前面的实验中曾经用同样的方法做出过结果,
后来就一直没有溶解圈出现了,一开始怀疑是药品变质了,更换之后还是没有,百思不得其解,这是本人的本科毕业设计,
时间不多了,较为着急,望有经验大神指点迷津!!

       因本人刚注册不久,金币缺乏,故给的较少,不过是真心求助,谢谢!
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Sun-

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 湛蓝哦still at 2016-07-25 10:03:45
请问您在做的时候 溶圈明显吗?我做出来的溶圈不明显 但不知道是哪里的问题...

纤维蛋白原溶解时总是有絮状物,请问你们是用什么溶解的?

发自小木虫Android客户端
6楼2017-06-23 15:17:50
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摩御萱

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问你做出来了么?我最近在做同样的,但是用的是人的纤维蛋白原和人的凝血酶。
3楼2015-09-17 19:13:56
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豪平

新虫 (初入文坛)

纤维蛋白平板法测酶活时,怎样才能做到让溶解圈圆润?
4楼2015-11-20 10:27:19
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湛蓝哦still

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 豪平 at 2015-11-20 10:27:19
纤维蛋白平板法测酶活时,怎样才能做到让溶解圈圆润?

请问您在做的时候 溶圈明显吗?我做出来的溶圈不明显 但不知道是哪里的问题
5楼2016-07-25 10:03:45
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