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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 如何将菌体从固体培养基上洗脱下来
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xiaomeng12

银虫 (正式写手)

[求助] 如何将菌体从固体培养基上洗脱下来 已有8人参与

请问如何将菌体从固体培养基上洗脱下来，以便用磁珠法进行DNA的提取？是不是可以用接种环将菌体稀释到灭过菌的生理盐水中去？
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1楼 2014-05-11 12:50:59
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

yhjcwangyw

铁杆木虫 (正式写手)
直接将无菌生理盐水加在有菌体的固体表面上，然后震荡洗脱

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2楼2014-05-11 12:58:02
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yhjcwangyw

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xiaomeng12 at 2014-05-11 13:00:44
生理盐水对之后提取DNA没有影响的吧？...

怕有影响，直接用无菌水是不是也可以呢！

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4楼2014-05-11 13:10:34
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追求梦的人

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你将你的菌接种到液体培养基，培养一段时间获得大量菌体，离心取沉淀（菌体），洗涤几次，获得菌体再提DNA不就行了嘛，我不知道你的试验有什么要求，我们以前做试验就是这法提的，仅供参考啊
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艰难困苦玉汝于成
11楼2014-05-13 11:56:12
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cherish婉婉

新虫 (初入文坛)

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用接种环刮下来 ，或者加入灭菌后的生理盐水 进行轻微振荡。
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努力，加油。
12楼2014-05-13 14:32:32
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吹着泡泡的夏

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用无菌水在枪头的作用下吹打下来（无菌水大约2ml左右），也可以加了无菌水在用接种环给挂下来
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走着走着就长大了
13楼2014-05-13 16:33:51
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xiaomeng12

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yhjcwangyw at 2014-05-11 12:58:02
直接将无菌生理盐水加在有菌体的固体表面上，然后震荡洗脱

生理盐水对之后提取DNA没有影响的吧？
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3楼2014-05-11 13:00:44
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xiaomeng12

银虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yhjcwangyw at 2014-05-11 13:10:34
怕有影响，直接用无菌水是不是也可以呢！
...

无菌水是不是是不是直接可以买的？还有翁问题，提取的DNA测A260/280大概在1.8左右，是不是大概可以推断是纯的，而不需要跑电泳，直接进行pcr
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5楼2014-05-11 13:15:44
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mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学

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★ ★
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xiaomeng12: 金币+2, ★有帮助, 谢谢 2014-05-23 22:00:56
用无菌水直接加到培养基表面，轻轻摇晃震荡后洗下菌苔，用无菌水离心重悬数次后再提DNA，以免盐和培养基成为的干扰。
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环境卫生、微生物学、卫生应急
6楼2014-05-12 08:19:42
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NTMD2013

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xiaomeng12: 金币+2, ★有帮助, 谢谢 2014-05-23 22:01:05
用无菌水直接加到培养基表面洗脱菌苔，轻轻摇晃震荡几分钟即可.
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7楼2014-05-12 19:43:07
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轩辕一剑

木虫 (小有名气)

技术员

【答案】应助回帖

★ ★
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xiaomeng12: 金币+2, ★有帮助, 谢谢 2014-05-23 22:01:19
无菌水洗涤，然后重悬洗涤多次
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天道酬勤
8楼2014-05-12 20:12:41
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07bio

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xiaomeng12: 金币+2, ★有帮助, 谢谢 2014-05-23 22:01:30
用棉签刮下来，灭菌水洗
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9楼2014-05-12 21:51:51
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖

★ ★
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xiaomeng12: 金币+2, ★有帮助, 谢谢 2014-05-23 22:01:40
刮下来就好，又不是长在培养基里面的，如果长在一起了，之前就应该用玻璃纸什么的收~~震荡洗什么的，除非你菌长得特别少，要不都没必要~
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10楼2014-05-13 10:30:21
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