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飘零星lin

金虫 (小有名气)

[求助] 请问有人用双酶切过petduet-1载体吗?用bamHI和Hind3 双酶切已有2人参与

用bamHI和Hind3 双酶切空载体petduet-1,thermo公司的酶,怎么才可以知道切完全?我要将一个300bp的小片段insert,转化后电泳一直条带位置不对,理论应该跑得更慢,结果比原质粒跑快了很多。不明所以。求经验分享!谢谢大家。在转化之前有没有什么办法判断酶切成功?
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zep616745243

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-05-07 15:25:03
转化之前证实双酶切完全与否不太容易,因为空载体的双酶切与单酶切在普通电泳上很难区分开,那个小片段很可能跑不出条带,PAGE电泳可以试试
只有不断地失败才会成功
2楼2014-05-07 15:16:37
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