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稻草人的学习

银虫 (小有名气)

[求助] 毕赤酵母电击转化已有10人参与

转化了都不成功,只长出一个转化子,怎么办?
感受太制备方法是:
1.挑取单菌落至50mlYPD液体中,培养24小时左右,再转接至50mlYPD中,使初始OD为0.2-0.3.培养至OD为1.2-1.3
2.冰浴30分钟,离心,用50ml遇冷的无菌水洗,在用25ml无菌水洗。再后用1m山梨醇20ml悬浮。最后用0.35mll山梨醇悬浮分装。

电击:线性化质粒7ul与80ul感受太混匀,转入0.1cm遇冷电击杯中,电击条件1.5kv  电容25  电阻200


只长出一个转化子  要么就不长  不知道哦怎么继续啦,请同学们帮忙
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PCR-CL

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我们使用的是0.2cm的电击杯,2.5kv电压
17楼2014-05-06 22:21:31
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