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1970-01-01 08:00:00
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智能机器人

Robot (super robot)

我们都爱小木虫

wlt728

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果说涂在抗性平板,长得单菌落很少或者不长,可能是质粒丢失(前体是稀释倍数不要太多),如果你想获得高表达的甘油菌,建议还是重新提质粒进行转化。如果刚构建好的菌种就出现这种现象,也可能说明你的质粒就不稳定,很容易丢失!应该换宿主菌试试!
I am not a hero , but I served with heroes!
5楼2014-05-05 19:51:34
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查看全部 8 个回答

猪尾巴草

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
576142326(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-04 19:49:52
576142326: 金币+1 2014-05-08 17:24:22
你是怎么知道甘油菌出现质粒丢失的?可以重新对甘油菌进行划线后挑单菌落,能生长的含有质粒,你再抽提质粒看看,然后保菌
2楼2014-05-04 17:37:10
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hytcher

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
576142326: 金币+1 2014-05-08 17:25:31
是否是提取质粒得量严重下降?或者提取不到?
如果是前者,可以通过划平板重新获得含质粒的单克隆。但也要注意是否是容易出现质粒容易丢失的情况。那样建议重新转。
如果是后者,在抗性没有问题的情况下,还是重新转比较好。很可能是被其他杂菌污染了。
3楼2014-05-04 22:49:03
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576142326

木虫 (正式写手)


引用回帖:
2楼: Originally posted by 猪尾巴草 at 2014-05-04 17:37:10
你是怎么知道甘油菌出现质粒丢失的?可以重新对甘油菌进行划线后挑单菌落,能生长的含有质粒,你再抽提质粒看看,然后保菌

我的甘油菌接菌不长,然后我就发现质粒丢失了,现在我划线后重新挑单菌落已经没问题了,但是担心重新划线的菌的质粒拷贝数会降低
4楼2014-05-05 12:48:14
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