应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 甘油菌出现质粒丢失现象后，通过重新对甘油菌进行划线后挑单菌落可以吗
81/1返回列表
查看: 4340  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

576142326

木虫 (正式写手)

[求助] 甘油菌出现质粒丢失现象后，通过重新对甘油菌进行划线后挑单菌落可以吗 已有4人参与

如题
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-05-04 17:29:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

猪尾巴草

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
576142326(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-05-04 19:49:52
576142326: 金币+1 2014-05-08 17:24:22
你是怎么知道甘油菌出现质粒丢失的？可以重新对甘油菌进行划线后挑单菌落，能生长的含有质粒，你再抽提质粒看看，然后保菌
赞一下 回复此楼
2楼2014-05-04 17:37:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hytcher

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
576142326: 金币+1 2014-05-08 17:25:31
是否是提取质粒得量严重下降？或者提取不到？
如果是前者，可以通过划平板重新获得含质粒的单克隆。但也要注意是否是容易出现质粒容易丢失的情况。那样建议重新转。
如果是后者，在抗性没有问题的情况下，还是重新转比较好。很可能是被其他杂菌污染了。
赞一下 回复此楼
3楼2014-05-04 22:49:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

576142326

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 猪尾巴草 at 2014-05-04 17:37:10
你是怎么知道甘油菌出现质粒丢失的？可以重新对甘油菌进行划线后挑单菌落，能生长的含有质粒，你再抽提质粒看看，然后保菌

我的甘油菌接菌不长，然后我就发现质粒丢失了，现在我划线后重新挑单菌落已经没问题了，但是担心重新划线的菌的质粒拷贝数会降低
赞一下 回复此楼
4楼2014-05-05 12:48:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wlt728

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果说涂在抗性平板，长得单菌落很少或者不长，可能是质粒丢失（前体是稀释倍数不要太多），如果你想获得高表达的甘油菌，建议还是重新提质粒进行转化。如果刚构建好的菌种就出现这种现象，也可能说明你的质粒就不稳定，很容易丢失！应该换宿主菌试试！
赞一下 回复此楼
I am not a hero , but I served with heroes！
5楼2014-05-05 19:51:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

576142326

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wlt728 at 2014-05-05 19:51:34
如果说涂在抗性平板，长得单菌落很少或者不长，可能是质粒丢失（前体是稀释倍数不要太多），如果你想获得高表达的甘油菌，建议还是重新提质粒进行转化。如果刚构建好的菌种就出现这种现象，也可能说明你的质粒就不稳 ...

我想问一下是不是只要BL菌中有这个质粒，那么在BL菌的不同单菌落中，它就会以相同的拷贝数存在，谢谢啦！
赞一下 回复此楼
6楼2014-05-08 17:28:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hytcher

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 576142326 at 2014-05-08 17:28:40
我想问一下是不是只要BL菌中有这个质粒，那么在BL菌的不同单菌落中，它就会以相同的拷贝数存在，谢谢啦！...

不是的。即使是同一个单克隆中的菌都不可能。
所以划平板时，不能让菌长的时间太久（克隆太大）。
赞一下 回复此楼
7楼2014-05-09 06:29:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏至1990

金虫 (小有名气)

小小虫

【答案】应助回帖

出现质粒丢失，我最近也出现这样，最好还是从新转化，保险靠谱一点，保菌的甘油浓度最好试着摸索下，我今天刚来验证，出现结果有空回来回个帖，目前楼主还是从新转化然后同时将菌株进行涂板，有抗性的板
赞一下 回复此楼
Sodoyouwanttotakealeapoffaith…orbecomeanoldman,filledwithregret…waitingtodiealone?
8楼2014-05-09 11:03:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 576142326 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 h4CP7TrQR8Lg 2026-08-22 5/250 2026-08-23 12:09 by LR9qGULyN2ew
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 9/450 2026-08-23 10:44 by IXZuIJ2Q7OVy
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +12 大萍1987 2026-08-20 14/700 2026-08-23 10:30 by wrm
[基金申请] 今天放榜吗？ +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 4/200 2026-08-23 04:04 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 7/350 2026-08-23 03:55 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 03:52 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 03:40 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 9/450 2026-08-23 03:04 by OEbVnUOu01ol
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 00:55 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +3 zjuhero 2026-08-22 4/200 2026-08-22 20:02 by mycsru
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[教师之家] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭