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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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lh318

新虫 (初入文坛)

[求助] 是否为引物二聚体 已有3人参与

DGGE后切胶,溶出DNA,用和原来相同的体系PCR,琼脂糖检验的图,maker最小为250bp,最大为2000bp,原来的体系PCR产物应在600bp左右,想请问亮的条带是引物二聚体吗?如果是的话,有哪些方法可以消除呢?为什么有些泳道有两个亮的条带呀?谢谢

是否为引物二聚体
PCR.JPG
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lh318

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-04-30 09:29:17
引物二聚体的亮度应该一样才对啊,貌似杂带。

杂带的话。是什么原因呢?是实验过程中有污染吗?
5楼2014-04-30 13:03:40
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-04-30 10:38:46
lh318: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-05-07 16:11:19
引物二聚体的亮度应该一样才对啊,貌似杂带。
2楼2014-04-30 09:29:17
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j2

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-04-30 10:38:50
lh318: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-05-07 16:11:46
引物二聚体的话也太亮了,完全没P出来。切胶回收没问题吧?
修炼ing,当虫仙……
3楼2014-04-30 09:41:42
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lh318

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by j2 at 2014-04-30 09:41:42
引物二聚体的话也太亮了,完全没P出来。切胶回收没问题吧?

切完胶,溶于灭菌超纯水。80度水浴20min,4度过夜后PCR的。有同学用这个方法做,测序成功了。
我之前是切完胶,溶于灭菌水和TE,然后煮沸10min后PCR,也送去测序过,当时十几条条带,只测出来两条,说是其他存在重叠峰的问题
4楼2014-04-30 13:01:43
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