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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » MTT测细胞生长曲线
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刘瑛2223

铜虫 (小有名气)

[求助] MTT测细胞生长曲线已有3人参与

请教各位：我用MTT做细胞生长曲线，用4×104/mL接种浓度接种在96孔板中，每孔100uL，一个时间点6复孔，培养1-8天，每天加10uL的MTT,培养4小时，弃掉旧液，加150uLDMSO，震荡10min，测OD值。请问我在震荡我加了MTT孔溶解结晶的时候，我没有加MTT的还需要继续培养的细胞同时也震荡了10min，会不会把我要继续培养的这些细胞震坏或者细胞漂浮起来不再贴壁了？有没有什么改进的方法或者更好的办法？
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成功的法宝是勇于探险
1楼2014-04-29 11:54:04
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caoshiyi2010

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
辣笔v小新: 金币+1, 鼓励应助交流 2014-05-08 08:11:20
我最近也在做这个，  加了DMSO的才震动呀    那些继续培养的不要管等时间到了加dmso再震动咯
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4楼2014-05-07 22:00:26
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HYZ221314

至尊木虫 (职业作家)

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
刘瑛2223: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-04-30 14:25:17
辣笔v小新: 金币+1, 鼓励应助交流 2014-05-08 08:10:51
震荡轻点，轻轻的，缓缓的就可以啦；为了确保实验条件一致性，都要震荡的

[ 发自小木虫客户端 ]
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青山不断，绿水长流
2楼2014-04-29 12:06:39
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刘瑛2223

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by HYZ221314 at 2014-04-29 12:06:39
震荡轻点，轻轻的，缓缓的就可以啦；为了确保实验条件一致性，都要震荡的

我们用的是专门可以放96孔板的震荡仪器，震荡10min，你说的轻轻的缓缓的震荡是怎么震荡的？轻缓的震荡结晶能充分溶解吗？
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成功的法宝是勇于探险
3楼2014-04-30 14:23:30
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众星揽月

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

生长曲线是测定细胞生长数的常用方法，也是判定细胞活力的重要指标，是培养细胞生物学特性的基本参数之一。一般细胞传代之后，经过短暂的悬浮后贴壁，随后渡过长短不同的潜伏期，即进入快速生长的指数生长期。在细胞达到饱和密度后，停止生长，进入平台期，然后退化衰亡。为了准确描述整个过程中细胞数目的动态变化，需连续对细胞进行计数。通常计数6天。为精确起见，一般每次实验设3个平行重复。 ——Engreen
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5楼2015-09-02 10:44:09
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