应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 为什么使用改变PH使蛋白变性，要在相应的缓冲buffer里？
51/1返回列表
查看: 2025  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

jiangxincsu

金虫 (小有名气)

[求助] 为什么使用改变PH使蛋白变性，要在相应的缓冲buffer里？ 已有2人参与

我的蛋白是无结构的，有杂蛋白不好分离
我想试2种方法纯化蛋白
1、调节PH到目的蛋白等电点，使目标蛋白沉淀，然后分离
2、我的蛋白比较耐酸，调低PH使其他杂蛋白沉淀，然后分离
但是师姐说调节PH必须要在相应PH的缓冲buffer里，我觉得不明白，因为PH的改变是影响蛋白的-COOH .NH2的H离子的解离，从而改变蛋白质的带点破环胶体的水化层，然后聚集沉淀的，这样不是只和溶液的H离子浓度有关吗？（ps我本科学化学的，师姐是学生物的，她解释不通）
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-04-29 09:15:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

猪尾巴草

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jiangxincsu at 2014-04-29 20:47:35
谢谢您的回复，还有2个问题请教一下哦
1、那么如果我想在强酸体系下让蛋白变性，还要用buffer吗？
2、五结构蛋白如果在强酸下变性，会失去活性吗？...

要用buffer,强酸会与氨基酸的氨基发生作用，使其变性，发生不可逆失活。如果你要纯化目的蛋白，最好用盐析。
赞一下 回复此楼
4楼2014-04-30 09:25:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

猪尾巴草

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jiangxincsu: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-05-02 14:38:10
是应该在缓冲Buffer，这样是为了使其PH变化不会太快，试想一个鸡蛋扔石头上好些，还是扔海绵上好些。
     希望对你有帮助。
赞一下 回复此楼
2楼2014-04-29 11:16:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangxincsu

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 猪尾巴草 at 2014-04-29 11:16:10
是应该在缓冲Buffer，这样是为了使其PH变化不会太快，试想一个鸡蛋扔石头上好些，还是扔海绵上好些。
     希望对你有帮助。

谢谢您的回复，还有2个问题请教一下哦
1、那么如果我想在强酸体系下让蛋白变性，还要用buffer吗？
2、五结构蛋白如果在强酸下变性，会失去活性吗？
赞一下 回复此楼
3楼2014-04-29 20:47:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangxincsu

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 猪尾巴草 at 2014-04-30 09:25:13
要用buffer,强酸会与氨基酸的氨基发生作用，使其变性，发生不可逆失活。如果你要纯化目的蛋白，最好用盐析。...

我已经试过盐析了，用的8mol的尿素，可是目的蛋白和杂蛋白都没有析出。
请问你还有什么比较好的分离方法吗？
赞一下 回复此楼
5楼2014-05-02 14:40:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 山东省面上项目限额评审 +4 石瑞0426 2026-03-19 4/200 2026-03-22 08:50 by Wei_ren
[考研] 材料与化工（0856）304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 266求调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-20 3/150 2026-03-21 16:46 by barlinike
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂 +12 yangfz 2026-03-17 12/600 2026-03-21 03:30 by JourneyLucky
[考研] 271材料工程求调剂 +8 .6lL 2026-03-18 8/400 2026-03-21 00:58 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交大，求调剂 +5 材化逐梦人 2026-03-18 5/250 2026-03-21 00:26 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕英一数二306 +7 z1z2z3879 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:48 by JourneyLucky
[考研] 南京大学化学376求调剂 +3 hisfailed 2026-03-19 6/300 2026-03-20 23:43 by hisfailed
[考研] 0817 化学工程 299分求调剂 有科研经历 有二区文章 +22 rare12345 2026-03-18 22/1100 2026-03-20 20:39 by zhukairuo
[考研] 一志愿 南京航空航天大学大学 ，080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-20 5/250 2026-03-20 20:16 by JourneyLucky
[考研] 0856调剂，是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考研] 生物学调剂招人！！！ +3 山海天岚 2026-03-17 4/200 2026-03-19 21:34 by 怎么释怀
[考研] 328求调剂，英语六级551，有科研经历 +4 生物工程调剂 2026-03-16 12/600 2026-03-19 11:10 by 生物工程调剂
[考研] 344求调剂 +6 knight344 2026-03-16 7/350 2026-03-18 20:13 by walc
[考研] 085601专硕，总分342求调剂，地区不限 +5 share_joy 2026-03-16 5/250 2026-03-18 14:48 by haxia
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
[考研] 301求调剂 +4 A_JiXing 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:32 by ruiyingmiao
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭