24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2037  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

jiangxincsu

金虫 (小有名气)

[求助] 为什么使用改变PH使蛋白变性,要在相应的缓冲buffer里? 已有2人参与

我的蛋白是无结构的,有杂蛋白不好分离
我想试2种方法纯化蛋白
1、调节PH到目的蛋白等电点,使目标蛋白沉淀,然后分离
2、我的蛋白比较耐酸,调低PH使其他杂蛋白沉淀,然后分离
但是师姐说调节PH必须要在相应PH的缓冲buffer里,我觉得不明白,因为PH的改变是影响蛋白的-COOH .NH2的H离子的解离,从而改变蛋白质的带点破环胶体的水化层,然后聚集沉淀的,这样不是只和溶液的H离子浓度有关吗?(ps我本科学化学的,师姐是学生物的,她解释不通)
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangxincsu

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 猪尾巴草 at 2014-04-29 11:16:10
是应该在缓冲Buffer,这样是为了使其PH变化不会太快,试想一个鸡蛋扔石头上好些,还是扔海绵上好些。
     希望对你有帮助。

谢谢您的回复,还有2个问题请教一下哦
1、那么如果我想在强酸体系下让蛋白变性,还要用buffer吗?
2、五结构蛋白如果在强酸下变性,会失去活性吗?
3楼2014-04-29 20:47:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

猪尾巴草

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jiangxincsu: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-05-02 14:38:10
是应该在缓冲Buffer,这样是为了使其PH变化不会太快,试想一个鸡蛋扔石头上好些,还是扔海绵上好些。
     希望对你有帮助。
2楼2014-04-29 11:16:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

猪尾巴草

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by jiangxincsu at 2014-04-29 20:47:35
谢谢您的回复,还有2个问题请教一下哦
1、那么如果我想在强酸体系下让蛋白变性,还要用buffer吗?
2、五结构蛋白如果在强酸下变性,会失去活性吗?...

要用buffer,强酸会与氨基酸的氨基发生作用,使其变性,发生不可逆失活。如果你要纯化目的蛋白,最好用盐析。
4楼2014-04-30 09:25:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangxincsu

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 猪尾巴草 at 2014-04-30 09:25:13
要用buffer,强酸会与氨基酸的氨基发生作用,使其变性,发生不可逆失活。如果你要纯化目的蛋白,最好用盐析。...

我已经试过盐析了,用的8mol的尿素,可是目的蛋白和杂蛋白都没有析出。
请问你还有什么比较好的分离方法吗?
5楼2014-05-02 14:40:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 274求调剂 +16 顾九笙要谦虚 2026-03-24 22/1100 2026-03-27 14:06 by stillstella
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工 264分各科过A区国家线 +10 哈哈157349 2026-03-21 10/500 2026-03-27 13:06 by zzll406
[考研] 299求调剂 +6 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 6/300 2026-03-27 12:43 by 果果妈咪
[考研] 085600材料与化工306 +10 z1z2z3879 2026-03-21 11/550 2026-03-27 11:31 by wangjy2002
[考研] 调剂 +3 李嘉图·S·路 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:19 by wangjy2002
[考研] 304求调剂 +3 曼殊2266 2026-03-27 3/150 2026-03-27 10:17 by guoweigw
[考研] 一志愿211院校 344分 东北农业大学生物学学硕,求调剂 +5 丶风雪夜归人丶 2026-03-26 6/300 2026-03-27 10:15 by barness
[考研] 359求调剂 +4 王了个楠 2026-03-25 4/200 2026-03-27 08:43 by 不吃魚的貓
[考研] 材料调剂 +8 匹克i 2026-03-23 8/400 2026-03-27 08:11 by hypershenger
[考研] 一志愿武汉理工,总分321,英一数二,求老师收留。 +5 nnnnnnn5 2026-03-25 5/250 2026-03-27 04:42 by wxiongid
[考研] 271求调剂 +6 生如夏花… 2026-03-22 6/300 2026-03-26 16:48 by 张凯十八号
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
[考研] 化学调剂一志愿上海交通大学336分-本科上海211 +4 小鱼爱有机 2026-03-25 4/200 2026-03-26 10:19 by aa331100
[考研] 299求调剂 +4 15188958825 2026-03-25 4/200 2026-03-25 22:56 by 418490947
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +7 niko- 2026-03-22 7/350 2026-03-25 20:14 by qingfeng258
[考研] 【2026考研调剂】制药工程 284分 求相关专业调剂名额 +4 袁奂奂 2026-03-25 8/400 2026-03-25 14:32 by lbsjt
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[考研] 070300,一志愿北航320求调剂 +3 Jerry0216 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:16 by 。。堂堂
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
信息提示
请填处理意见