24小时热门版块排行榜    

查看: 721  |  回复: 5

summit061800

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR,电泳 已有2人参与

PCR产物跑电泳后,在上样孔下有浅浅的条带,感觉像没有反应的DNA,请问这是什么原因导致的?再一个问题,我最近做的PCR总是一次一个结果,平大家帮我分析分析原因,多谢

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

猪尾巴草

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
summit061800(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-04-25 18:53:03
1、上样孔下有浅浅的条带,可能是你DNA模版加量太多,或者你的加样孔不干净。
2、做的PCR总是一次一个结果,你是指P出来的条带大小不对?如果大小不对,可能Marker过期了,可能与你配胶浓度有关,请问你电泳跑出的条带有拖曳吗?有拖曳的话,可能是你的体系被污染了
希望对你有帮助。
2楼2014-04-25 17:29:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

summit061800

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 猪尾巴草 at 2014-04-25 17:29:51
1、上样孔下有浅浅的条带,可能是你DNA模版加量太多,或者你的加样孔不干净。
2、做的PCR总是一次一个结果,你是指P出来的条带大小不对?如果大小不对,可能Marker过期了,可能与你配胶浓度有关,请问你电泳跑出的 ...

谢谢,没有托尾现象。我没有表达清楚,我所说的一次一个结果是这样的,A样品今天有目的条带,明天再做A就没有了,B样品C样品可能又出现目的条带了,难道是我的引物特异性不好么?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2014-04-27 03:06:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

猪尾巴草

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by summit061800 at 2014-04-27 03:06:24
谢谢,没有托尾现象。我没有表达清楚,我所说的一次一个结果是这样的,A样品今天有目的条带,明天再做A就没有了,B样品C样品可能又出现目的条带了,难道是我的引物特异性不好么?
...

是不是你加PCR体系时,漏加了东西
4楼2014-04-28 10:53:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

summit061800

新虫 (初入文坛)

这个应该没有,我也怀疑过,所以我加的时候特别留意了。哎,这几天我都不敢做了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
5楼2014-04-29 03:29:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhaoxiaopang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我也是出现这种情况,做的菌落PCR。上周做的PCR是出现有目的条带,然后再重复就什么也P不出来了,各种条件都是一样的,菌落和条件也是一样的,真心搞不懂原因啊!
6楼2014-04-29 10:09:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 summit061800 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +37 医学老男孩 2026-08-13 87/4350 2026-08-18 06:35 by 医学老男孩
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +4 基诺咪客 2026-08-17 4/200 2026-08-17 16:10 by Vivilian
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +12 Ldrop2023 2026-08-13 15/750 2026-08-17 15:02 by 小豌豆_发芽
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 6/300 2026-08-16 20:07 by 奶牛小黑
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
信息提示
请填处理意见