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zq4725106

新虫 (初入文坛)

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[求助] 鞘氨醇单胞菌菌液PCR总是P不出来

请教各位大虾，我最近在做鞘氨醇单胞菌中基因的敲除，最后筛阳性结果的时候需要菌液或菌落PCR，做过好多次，总是不稳定，有哪位大虾做过，可否传授一下经验？
我用的体系是：2*easymix（transgen） 12.5ul 上下游引物10mM 1ul 菌液（24h）1ul 25ul体系产物2.4K。预变性我是98℃ 10Min。也试过takara的分开的体系，还是不行。

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1楼 2014-04-21 10:39:11

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出去吃饭吧

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专业: 微生物遗传育种学

你好，请问一下你是用什么方法做的基因敲出呢？

我爱旅行

2楼2015-06-15 13:54:36

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