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zq4725106

新虫 (初入文坛)

[求助] 鞘氨醇单胞菌菌液PCR总是P不出来

请教各位大虾,我最近在做鞘氨醇单胞菌中基因的敲除,最后筛阳性结果的时候需要菌液或菌落PCR,做过好多次,总是不稳定,有哪位大虾做过,可否传授一下经验?
我用的体系是:2*easymix(transgen) 12.5ul    上下游引物10mM 1ul  菌液(24h)1ul     25ul体系   产物2.4K。预变性我是98℃ 10Min。也试过takara的分开的体系,还是不行。
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出去吃饭吧

金虫 (小有名气)

淑女

你好,请问一下你是用什么方法做的基因敲出呢?
我爱旅行
2楼2015-06-15 13:54:36
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