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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 实验室分析、仪器 » 层析柱分离纯化，懂得亲们来帮帮忙啊
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李畅0527

铁虫 (初入文坛)

[求助] 层析柱分离纯化，懂得亲们来帮帮忙啊 已有7人参与

我将蛋白水解后应该有很多不同分子量的肽，经分子筛分离应该有很多峰，可是为什么只出了一个穿透峰呢，明白的请帮我分析一下。我用的填料是葡聚糖凝胶G25，柱子是1.6*40cm的。上样浓度是50mg/ml，不出峰是不是跟浓度有关系啊？
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1楼 2014-04-19 16:14:05
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李畅0527

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by //安生 at 2014-04-22 08:44:06
换个长些的柱子吧，个人认为与柱子长度有关，本人正在进行这方面的纯化实验，80cm的柱子，装了将近次柱子，只有1次最满意，，，不是人为可以控制的啊，努力装的一样，可峰型还是还是有差异的加油

你也是分子筛的么？就是根据分子量不同先后洗出。如果真是柱子太短没分离开，不是应该有一个大分子的峰么，可是我的怎么一个都没出。请问你上样的浓度是多少啊？
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8楼2014-04-22 15:45:42
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
你应该可以画一条曲线，横轴是收集管，纵轴是A280.
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2014-04-19 23:14:09
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1034181008

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1、有可能还没分开呢，这么短的柱子，要是你自己填充的，柱效应该没那么高。2、浓度可能太低，检测不出。个人拙见，你再试试。
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3楼2014-04-19 23:22:30
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//安生

金虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
换个长些的柱子吧，个人认为与柱子长度有关，本人正在进行这方面的纯化实验，80cm的柱子，装了将近次柱子，只有1次最满意，，，不是人为可以控制的啊，努力装的一样，可峰型还是还是有差异的加油
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日久不一定生情，但必定见人心。
4楼2014-04-22 08:44:06
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