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水墨蓝

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
20楼: Originally posted by 落落_无尘 at 2014-04-17 21:37:17
这个不是序列的问题,我的意思是说首先是MCS的酶切位点之间碱基数目少,两个酶不容易同时靠近,所以可能部分就没有切出两个位点来,这部分就算单酶切,另一部分可以这个酶切完了那个酶再去切。单酶切只是断开化学键 ...

我同时切了4个载体,有的载体单酶切是一条带,有的是2条带,不过2条带很相近,跟双酶切出现的现象差不多
21楼2014-04-18 10:36:21
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Neo2000

木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
水墨蓝(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-18 12:34:03
首先,做两个单酶切试试,切开了就一条细细的带,要是没问题,少切点质粒试试,这东西切多了不是好事

[ 发自小木虫客户端 ]
22楼2014-04-18 11:03:03
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水墨蓝

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
22楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-18 11:03:03
首先,做两个单酶切试试,切开了就一条细细的带,要是没问题,少切点质粒试试,这东西切多了不是好事

我同时切了4个载体,其中3个是pet系列的,另外一个是PGEX的 pet的转化后疯长,PGEX就一点不长  已验证过抗性都没问题  4个载体单酶切的时候有的会出现非常相近的2条带 我就在想是不是载体切得有问题
23楼2014-04-18 11:07:03
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凌枫miracle

新虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
酶切可能出问题了,看看酶是否用对了?酶切体系及时间也多注意下。

[ 发自小木虫客户端 ]
24楼2014-04-18 13:33:27
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