应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR产物，只有引物二聚体，，怎么办
51/1返回列表
查看: 7627  |  回复: 21
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

韩元富豪

金虫 (小有名气)

[求助] PCR产物，只有引物二聚体，，怎么办 已有10人参与

小妹已经做了多次基因组DNAＰＣＲ，每次扩增出来的只有引物二聚体，连目标条带都没有，我设置的pcr参数是：
F1:2ul
F2:2ul
DNA模板：2ul
PCR Mix:25ul
ddH2O:19ul
两条引物的Tm分别是70.7、64.4，我设的ＰＣＲ的Ｔｍ是60，扩增出来只有引物二聚体.又用60的退火温度做了一次，还是只有引物二聚体，怎么办
,
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-04-16 18:07:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)
片段已知吗？如果已知做过梯度，总能P出来，如果未知就得考虑引物特异性了，P不出来可能是引物不特异
赞一下 回复此楼
10楼2014-04-17 10:23:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 22 个回答

for5

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
韩元富豪(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-16 19:19:07
温度继续降，直到p出来为止。或者设一个touchdown的程序，设一个初始温度，一个降低温度以及一个终点温度

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
操蛋的XX
2楼2014-04-16 18:11:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

userhung

禁虫 (文学泰斗)

木虫博士
帮顶，blessing, blessing, blessing ! ~~~
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2014-04-16 18:47:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuren2009

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
韩元富豪: 金币+1 2014-04-17 21:38:41
我感觉你还是从引物特异性分析，其次再筛选退火温度。退火温度不一定非得低于TM值5度以下，为什么不从较低的那个TM值开始呢？
赞一下(1人) 回复此楼
学习使你立于不败之地
5楼2014-04-16 20:15:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 22 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭