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柠檬可乐星

新虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
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专业: 生物大分子结构与功能

[求助] 菌落PCR有杂带已有5人参与

各位大虾，下面是我菌落PCR电泳检测的结果，主带是我的目的条带，但是这次PCR结果基本都有较明显的杂带，是我PCR操作的问题，还是其他什么原因呢？还有就是这样的菌液送测序，结果不好吗？

2014.4.15-18s.png

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越努力越幸运

1楼2014-04-15 17:57:44

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PCR-CL

新虫 (初入文坛)

应助: 13 (小学生)
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专业: 生物化学

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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柠檬可乐星: 金币+2 2014-04-17 10:19:47
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-18 12:35:31

从菌液中扩增得到的结果，已经不错了！有点儿非特异扩增是正常的！

若想改善，方案：
1、提高退火温度。
2、换高退火、特异性高的引物。
3、。。。。。。

如果你的目的只是为了测序，那就不需要研讨条件，直接切胶回收后送测序就可以。

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10楼2014-04-16 21:19:39

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