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wanglixia815

新虫 (正式写手)

[求助] 已经快PCR折磨疯了。。救命呀 已有11人参与

最近P出来的带总是很模糊。。。我的是要拿去的测序,第一次做,现在又有一个问题不懂。送去测序是送PCR products
还是需要什么切胶回收是什么意思?直接送PCR products 和 为什么有的要切胶之回收之后再送啊。。有什么区别。。
请大神们解释一下。。
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有点矛盾。有点纠结
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whitewave

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
7楼: Originally posted by wanglixia815 at 2014-04-09 20:59:46
我已经更改过好多条件了。。。http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=7236813这是我最近一下做的,这样的我可以拿去测序,我还不会切胶呢。。。折磨呀...

看了大家给你出的主意,比较全面,我先问个问题,你这个胶是银染还是怎么处理的,呈这样,不是一般都EB紫外曝光黑白色吗?关于配胶这些所有的你不懂该看分子克隆!我只提几个建议,你配胶用的TAE这样东西时间久吗,有人用了正常吗?胶弯的除了胶孔还有一个比较少见的就是电泳的电阻丝就比较弯!你是新手建议你把目标基因发来大家给你设计下引物!有人建议你跑清水阴性对照,我就没有搞明白,东西都没有确定跑出来,不做阳性对照确定操作跟试剂没有问题,整那些有用?就这么多了!凌晨三点了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
天生我才
22楼2014-04-11 02:58:54
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ljj0720

银虫 (正式写手)


myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-04-10 19:00:48
直接送PCR products去测序可以,切胶之回收之后再送当然也可以,切胶回收后,浓度会高一些,记得 测序的时候给他们引物,祝好运
2楼2014-04-09 20:34:07
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-04-10 19:00:56
有可能出问题的地方很多,说的详细点,好帮你分析

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-04-09 20:35:42
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wanglixia815

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ljj0720 at 2014-04-09 20:34:07
直接送PCR products去测序可以,切胶之回收之后再送当然也可以,切胶回收后,浓度会高一些,记得 测序的时候给他们引物,祝好运

我跑出来的带是模糊的,跑胶的目的就是为了看PCR的产品有无问题?
有点矛盾。有点纠结
4楼2014-04-09 20:47:07
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