应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » MAPK通路
91/1返回列表
查看: 1761  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

polly2879

新虫 (初入文坛)

[求助] MAPK通路 已有1人参与

最近再做MAPK的western，看来血清的影响很大。
我用5%FBS 的DMEM养的J774细胞，待细胞铺好板之后换成无血清的DMEM处理12h~14h，再用LPS处理，并设置不处理的阴性对照。
但实验结果总是，LPS实验组的p-ERK1/2有条带，正常；没处理的阴性对照也有条带，这是为什么啊？
是否饥饿处理得不对？
求大神指教怎样能做出ERK1/2不被激活的阴性对照？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2014-04-08 14:51:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huiting410

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-04-09 18:33:48
可能本身细胞就有这个通路的开启啊，但是LPS处理后p-JNK表达量应该上调很多
赞一下 回复此楼
2楼2014-04-09 16:04:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

polly2879

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by huiting410 at 2014-04-09 16:04:42
可能本身细胞就有这个通路的开启啊，但是LPS处理后p-JNK表达量应该上调很多

LPS处理的话，有效时间是多久啊？我用细菌侵染8个小时后，LPS也是处理8个小时，但是LPS处理组那时候效果就不明显了
赞一下 回复此楼
3楼2014-04-14 15:53:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huiting410

金虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by polly2879 at 2014-04-14 15:53:48
LPS处理的话，有效时间是多久啊？我用细菌侵染8个小时后，LPS也是处理8个小时，但是LPS处理组那时候效果就不明显了...

得看你是什么细胞了，你可以做一个时间梯度的，有的细胞表达时间特别早，几十分钟可能就达到高峰了
赞一下 回复此楼
4楼2014-04-14 20:16:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

polly2879

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by huiting410 at 2014-04-14 20:16:11
得看你是什么细胞了，你可以做一个时间梯度的，有的细胞表达时间特别早，几十分钟可能就达到高峰了...

恩，好的，谢谢
亲你做这方面的实验么
赞一下 回复此楼
5楼2014-04-16 10:56:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huiting410

金虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by polly2879 at 2014-04-16 10:56:26
恩，好的，谢谢
亲你做这方面的实验么...

曾做过
回复此楼
6楼2014-04-16 11:38:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

polly2879

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by huiting410 at 2014-04-16 11:38:41
曾做过...

那是用什么细胞啊？我现在是用细菌刺激细胞观察细胞信号通路的变化，你当时做的时候是细菌还是药物还是蛋白刺激呢？刺激什么细胞啊
赞一下 回复此楼
7楼2014-04-21 13:53:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huiting410

金虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by polly2879 at 2014-04-21 13:53:54
那是用什么细胞啊？我现在是用细菌刺激细胞观察细胞信号通路的变化，你当时做的时候是细菌还是药物还是蛋白刺激呢？刺激什么细胞啊...

药物刺激 细胞有很多种类了，内皮细胞 免疫细胞 结肠癌细胞
赞一下 回复此楼
8楼2014-04-21 17:44:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

纸鸢之梦

至尊木虫 (著名写手)
你好，我也需要J774细胞，请问你能否赠与一些呢
赞一下 回复此楼
9楼2014-05-09 18:41:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 polly2879 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +3 芦lty 2026-03-25 4/200 2026-03-25 23:25 by 芦lty
[考研] 一志愿 西北大学 总分282 英语一62 求调剂 +3 18419759900 2026-03-25 3/150 2026-03-25 23:20 by peike
[考研] 303求调剂 +6 蓝山月 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:47 by 418490947
[考研] 07化学303求调剂 +5 睿08 2026-03-25 5/250 2026-03-25 22:46 by 418490947
[考研] 308求调剂 +5 墨墨漠 2026-03-25 5/250 2026-03-25 22:19 by 544594351
[考研] 材料专硕 335 分求调剂 +4 拒绝冷暴力 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:45 by haxia
[考研] 302求调剂 +4 锦衣卫藤椒 2026-03-25 4/200 2026-03-25 16:29 by 功夫疯狂
[考研] 359求调剂 +3 王了个楠 2026-03-25 3/150 2026-03-25 12:50 by Dyhoer
[考研] 285求调剂 +3 AZMK 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:23 by userper
[考研] 318求调剂 +3 plum李子 2026-03-23 3/150 2026-03-25 09:42 by 雾散后相遇lc
[考研] 求调剂，一志愿:南京航空航天大学大学 ，080500材料科学与工程学硕，总分289分 +6 @taotao 2026-03-19 6/300 2026-03-25 08:37 by 木托莫露露
[考研] 食品专硕 一志愿双一流 328 +3 xiaom99 2026-03-21 4/200 2026-03-24 21:20 by lailaisimei
[考研] 化工专硕求调剂 +3 question挽风 2026-03-24 3/150 2026-03-24 18:48 by jhhcooi
[考研] 一志愿吉大化学322求调剂 +4 17501029541 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:21 by 戴围脖的小蚊子
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 12/600 2026-03-24 09:03 by jhybd
[考研] 一志愿国科过程所081700，274求调剂 +3 三水研0水立方 2026-03-23 3/150 2026-03-23 23:11 by MajorWen
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境，总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 266求调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-20 3/150 2026-03-21 16:46 by barlinike
[考研] 一志愿西南交通 专硕 材料355 本科双非 求调剂 +5 西南交通专材355 2026-03-19 5/250 2026-03-20 21:10 by JourneyLucky
[考研] 295复试调剂 +8 简木ChuFront 2026-03-19 8/400 2026-03-20 20:44 by zhukairuo
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭