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LAMME5

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 2401
散金: 20
帖子: 83
在线: 81小时
虫号: 2308628
注册: 2013-03-01
专业: 微生物生理与生物化学

[求助] 克隆表达基因大小不对了怎么回事？已有2人参与

最近做克隆表达，先克隆出枯草芽孢杆菌一段基因，连pMA5质粒，先转大肠杆菌JM109，酶切验证和PCR验证大小正确，保藏菌种。但是过了一段时间后，重新活化菌种，提质粒，发现酶切和PCR验证大小都不对，基因变小了这是怎么回事呢最近很郁闷的啊担心是染菌了划线挑单菌落还是不对到底是什么原因的呢求大神指导一下啊谢谢

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1楼2014-04-08 08:47:24

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

tccwinnie

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 477
帖子: 10
在线: 11.4小时
虫号: 2149087
注册: 2012-11-26
专业: 生物大分子结构与功能

请问楼主这个问题解决了没有，我现在也遇到了这个问题，冻存的重新提了质粒，大小正确，可是做转化后，有水解圈的质粒大小却变小了，双酶切也切不动，不知道为什么，求解

6楼2014-04-14 10:38:36

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