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Hliotrope木虫 (著名写手)
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电转化DH5α感受态 已有3人参与
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| 最近要建基因组文库，需要电转化DH5α感受态，有没有哪位虫友做过电转化DH5α感受态的制备，方法是什么？谢谢~~ |
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樊樊
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，看到也字就一阵心酸，我也在建。看人们说的TA连接简单的跟一一样，为什么我连最基本的都长不出来，后面怎么办、、
8楼2014-04-08 09:58:54
樊樊
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2楼2014-04-06 10:13:10
【答案】应助回帖
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与热激法最大的区别是转化需要的菌体浓度要高得多，因为电击中有70%以上的菌体会死亡。其次是菌体的离子浓度不能高，不然电击中会产生电弧，所以热激用的氯化钙被替换为10%甘油，用于悬浮和保存。具体方法你可以参照bio-rad公司电转仪的使用手册，或者具体的某篇文献。点转方法1990年左右就已成熟，很多文献采用和改进的报道。 [ 发自小木虫客户端 ] |
3楼2014-04-06 10:41:36
Hliotrope
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4楼2014-04-06 22:08:31
30