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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 电转化DH5α感受态
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Hliotrope

木虫 (著名写手)

[求助] 电转化DH5α感受态 已有3人参与

最近要建基因组文库，需要电转化DH5α感受态，有没有哪位虫友做过电转化DH5α感受态的制备，方法是什么？谢谢~~
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Someone
1楼 2014-04-06 08:15:36
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樊樊

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by Hliotrope at 2014-04-06 22:09:25
你也建文库？
...

，看到也字就一阵心酸，我也在建。看人们说的TA连接简单的跟一一样，为什么我连最基本的都长不出来，后面怎么办、、
你做到什么程度了？
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8楼2014-04-08 09:58:54
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樊樊

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
最近我也在做，我采用的是热激转化，没成功
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2楼2014-04-06 10:13:10
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枫桥书生

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-04-06 16:25:44
gyesang: 应助指数+1 2014-04-11 00:31:09
与热激法最大的区别是转化需要的菌体浓度要高得多，因为电击中有70%以上的菌体会死亡。其次是菌体的离子浓度不能高，不然电击中会产生电弧，所以热激用的氯化钙被替换为10%甘油，用于悬浮和保存。具体方法你可以参照bio-rad公司电转仪的使用手册，或者具体的某篇文献。点转方法1990年左右就已成熟，很多文献采用和改进的报道。

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2014-04-06 10:41:36
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Hliotrope

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 枫桥书生 at 2014-04-06 10:41:36
与热激法最大的区别是转化需要的菌体浓度要高得多，因为电击中有70%以上的菌体会死亡。其次是菌体的离子浓度不能高，不然电击中会产生电弧，所以热激用的氯化钙被替换为10%甘油，用于悬浮和保存。具体方法你可以参照 ...

好的，谢谢。。。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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Someone
4楼2014-04-06 22:08:31
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