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Hliotrope

木虫 (著名写手)

[求助] 电转化DH5α感受态 已有3人参与

最近要建基因组文库,需要电转化DH5α感受态,有没有哪位虫友做过电转化DH5α感受态的制备,方法是什么?谢谢~~
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Someone
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Hliotrope

木虫 (著名写手)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 樊樊 at 2014-04-09 15:36:35
    貌似我们不在一个频道上呢...

那就详细点说说这件事吧。。。
Someone
13楼2014-04-09 16:45:53
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樊樊

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
最近我也在做,我采用的是热激转化,没成功
2楼2014-04-06 10:13:10
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枫桥书生

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-04-06 16:25:44
gyesang: 应助指数+1 2014-04-11 00:31:09
与热激法最大的区别是转化需要的菌体浓度要高得多,因为电击中有70%以上的菌体会死亡。其次是菌体的离子浓度不能高,不然电击中会产生电弧,所以热激用的氯化钙被替换为10%甘油,用于悬浮和保存。具体方法你可以参照bio-rad公司电转仪的使用手册,或者具体的某篇文献。点转方法1990年左右就已成熟,很多文献采用和改进的报道。

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-04-06 10:41:36
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Hliotrope

木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 枫桥书生 at 2014-04-06 10:41:36
与热激法最大的区别是转化需要的菌体浓度要高得多,因为电击中有70%以上的菌体会死亡。其次是菌体的离子浓度不能高,不然电击中会产生电弧,所以热激用的氯化钙被替换为10%甘油,用于悬浮和保存。具体方法你可以参照 ...

好的,谢谢。。。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
Someone
4楼2014-04-06 22:08:31
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