24小时热门版块排行榜    

查看: 2559  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

摩羯的心

铁虫 (小有名气)

[求助] takara 热启动酶 已有3人参与

各位虫友 谁用过takara的热启动酶,我之前用普通taq酶能P出来的样品 现在换成热启动酶 为什么P不出目的条带了 程序是:92度 预变性4min ,92度 40s
58度 40s 72度 1min 30s,35个循环,最后72度延伸7min 大家帮忙分析是怎么回事呢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

你是路人甲

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

热启动TAQ酶经过修饰,一般在95度加热5-10分钟活性中心才会暴露,才会产生聚合作用,热启动TAQ酶对扩增的特异性非常重要,但目前国内能生产性能较好的热启动TAQ酶的公司并不多,用的较多的主要有QIAGEN、BIOLINE、BIODAI等,建议楼主再提高些温度
5楼2019-03-28 15:55:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
摩羯的心(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-02 09:46:55
摩羯的心: 金币+1 2014-04-03 09:10:03
酶就这样,我们实验室有时用普通Taq扩出来,用高保真酶扩不出来。我们一般是用普通Taq酶扩出来多送几个样测序,挑没有突变的样做下一步工作。
hehe
2楼2014-04-02 09:33:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cm8002

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
摩羯的心: 金币+1 2014-04-03 09:09:57
这个得仔细看看说明书,我记得takara的高保真酶退火变性不需要那么长时间,看你的目的基因长度,应该15s左右就差不多
3楼2014-04-02 21:20:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cxkhhh

新虫 (小有名气)

在50μl的反应体系里, BIOGHC DNA Polymerase的用量最好不要低于1.5 U。PCR反应开始前,应将反应混合物95℃加热6分钟。一般地,反应条件可设置为:95℃,30 sec;55℃,30sec;72℃,30sec (500bp以内)。
4楼2019-02-20 15:32:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] FileCode能看出啥? +7 要乐观耀哥 2026-08-10 15/750 2026-08-10 19:29 by 要乐观耀哥
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +10 yufeiwaner 2026-08-09 11/550 2026-08-10 18:47 by yufeiwaner
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +3 瞬息宇宙 2026-08-10 3/150 2026-08-10 18:27 by Tide man
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 11/550 2026-08-10 17:09 by 六两废铜
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +4 布布和一二 2026-08-10 4/200 2026-08-10 14:50 by 医学老男孩
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
请填处理意见