24小时热门版块排行榜    

查看: 2432  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

摩羯的心

铁虫 (小有名气)

[求助] takara 热启动酶 已有3人参与

各位虫友 谁用过takara的热启动酶,我之前用普通taq酶能P出来的样品 现在换成热启动酶 为什么P不出目的条带了 程序是:92度 预变性4min ,92度 40s
58度 40s 72度 1min 30s,35个循环,最后72度延伸7min 大家帮忙分析是怎么回事呢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cm8002

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
摩羯的心: 金币+1 2014-04-03 09:09:57
这个得仔细看看说明书,我记得takara的高保真酶退火变性不需要那么长时间,看你的目的基因长度,应该15s左右就差不多
3楼2014-04-02 21:20:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
摩羯的心(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-02 09:46:55
摩羯的心: 金币+1 2014-04-03 09:10:03
酶就这样,我们实验室有时用普通Taq扩出来,用高保真酶扩不出来。我们一般是用普通Taq酶扩出来多送几个样测序,挑没有突变的样做下一步工作。
hehe
2楼2014-04-02 09:33:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cxkhhh

新虫 (小有名气)

在50μl的反应体系里, BIOGHC DNA Polymerase的用量最好不要低于1.5 U。PCR反应开始前,应将反应混合物95℃加热6分钟。一般地,反应条件可设置为:95℃,30 sec;55℃,30sec;72℃,30sec (500bp以内)。
4楼2019-02-20 15:32:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

你是路人甲

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

热启动TAQ酶经过修饰,一般在95度加热5-10分钟活性中心才会暴露,才会产生聚合作用,热启动TAQ酶对扩增的特异性非常重要,但目前国内能生产性能较好的热启动TAQ酶的公司并不多,用的较多的主要有QIAGEN、BIOLINE、BIODAI等,建议楼主再提高些温度
5楼2019-03-28 15:55:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 287求调剂 +9 晨昏线与星海 2026-03-19 10/500 2026-03-25 09:51 by 雾散后相遇lc
[考研] 303求调剂 +5 元夕元 2026-03-20 6/300 2026-03-25 09:48 by 雾散后相遇lc
[考研] 材料学硕333求调剂 +3 北道巷 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:17 by pswait
[考研] 070300化学求调剂 +9 苑豆豆 2026-03-20 9/450 2026-03-24 17:15 by licg0208
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境,总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 材料与化工085600,总分304,本科有两篇sci参与,求调剂 +4 幸运的酱酱 2026-03-22 5/250 2026-03-22 20:15 by edmund7
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
[考研] 319求调剂 +4 小力气珂珂 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:53 by ColorlessPI
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 一志愿华中科技大学071000,求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 一志愿南大,0703化学,分数336,求调剂 +3 收到VS 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
[考研] 313求调剂 +4 肆叁贰壹22 2026-03-19 4/200 2026-03-21 17:33 by ColorlessPI
[考研] 材料 271求调剂 +5 展信悦_ 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:29 by 学员8dgXkO
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 332求调剂 +3 凤凰院丁真 2026-03-20 3/150 2026-03-21 10:27 by luoyongfeng
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境专硕,总分308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:39 by JourneyLucky
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 295复试调剂 +8 简木ChuFront 2026-03-19 8/400 2026-03-20 20:44 by zhukairuo
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
[考研] 320求调剂0856 +3 不想起名字112 2026-03-19 3/150 2026-03-19 22:53 by 学员8dgXkO
信息提示
请填处理意见