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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 封闭，一抗，二抗时的温度 时间
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永峰1230

铜虫 (小有名气)

[求助] 封闭，一抗，二抗时的温度 时间 已有2人参与

封闭，一抗，二抗时   一定要  摇动吗？其温度在室温能够过夜吗？？？
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12
1楼 2014-03-27 23:18:25
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xscljl

银虫 (初入文坛)
封闭时常用5%的脱脂牛奶溶液，用PBST配制。一抗及二抗时必须摇动，使膜与抗体充分接触。另外尽量不要在室温过夜，防止抗体buffer变性和抗体快速失效。
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14楼2014-04-01 20:00:40
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东方一叶

铜虫 (小有名气)
不知道，新人

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-03-28 00:43:00
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d00614028

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
永峰1230: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-03-28 13:46:51
一定要在摇床上晃动，常温最好不要过夜，一般封闭常温半小时，一抗2h，二抗1.5h，如果一抗二抗特异性不好也可以再一抗二抗孵育时在一抗二抗中加入奶粉。不懂的可以再问。
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永峰1230
3楼2014-03-28 09:09:05
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永峰1230

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by d00614028 at 2014-03-28 09:09:05
一定要在摇床上晃动，常温最好不要过夜，一般封闭常温半小时，一抗2h，二抗1.5h，如果一抗二抗特异性不好也可以再一抗二抗孵育时在一抗二抗中加入奶粉。不懂的可以再问。

请问  ，，脱脂奶粉  有什么要求吗，？
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12
4楼2014-03-28 13:47:18
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