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新虫 (初入文坛)

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[求助] 间充质干细胞软骨pellet诱导后怎么做切片？

关于间充质干细胞软骨pellet诱导，诱导后的pellet怎么做切片。有说冰冻切片的，步骤入下：
1、4%多聚甲醛固定24小时。
2、20%蔗糖脱水至沉底。
3、沉底组织OCT包埋，-20度恒冷箱中切片。
请问哪里是欠缺？有说的梯度浓度蔗糖脱水，各个浓度分别多久？
还有石蜡包埋切片步骤如下：
1、福尔马林固定。
2、脱水：50% 乙醇（90min）→70% 乙醇（90min）→85%乙醇(90min) →95%乙醇(90min)→100%乙醇(60min)→100%乙醇(60min)。
3、透明：1/2乙醇＋1/2二甲苯 → 二甲苯 → 二甲苯，每步60min。
4、渗透： 1/2二甲苯＋1/2石蜡(90min)→石蜡I (120min)→石蜡II(120min),62℃。
5、包埋：将组织放入盛有石蜡的模具中，摆好位置，于石蜡包埋机的冷台上冷却。
6、切片、贴片。
步骤是否正确？
请问这两种方法效果是否有差别？非常感谢！

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1楼2014-03-26 17:37:18

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