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cindyA

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求助!关于液相色谱目标峰和杂质峰保留时间相差很远的问题 已有2人参与

求问各位大侠!流动相 乙腈和水(0.1%的三氟乙酸)50:50,柱子 C18柱
检测波长227 nm ,柱温 40度,测得目标化合物的保留时间在4.7 min,在17 min 和25min又分别出了一个杂质峰。想问一下目标峰和杂质峰保留时间相差很大怎么办? 补充:目标化合物含氨基,极性有些大
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maxmahao

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
走梯度啊,后面乙腈比例往上走即可

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2014-03-25 15:03:42
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fagui168

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
cindyA: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-03-25 17:33:52
你这个目标化合物4.7min 个人觉得还是出的油点早了,建议还是将开始的比例调小一些如:45%然后等目标化合物出来后的的3-4min后将比例梯度上升 慢一些。这样我觉得应该会是你想要的效果。 另外 我觉得你的液相条件我咋就这么熟悉呢,流动相、比例、波长、柱温完全一样。My god1

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

改变你不能改变的,适应你不能适应的
3楼2014-03-25 15:15:09
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cindyA

铁虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by fagui168 at 2014-03-25 15:15:09
你这个目标化合物4.7min 个人觉得还是出的油点早了,建议还是将开始的比例调小一些如:45%然后等目标化合物出来后的的3-4min后将比例梯度上升 慢一些。这样我觉得应该会是你想要的效果。 另外 我觉得你的液相条件我 ...

是的吗?这是我自己摸得条件哪,我刚也想了一下,你的建议对我很有帮助,目标化合物保留时间是不是在5min之后才好,一般几分钟之内的我们可以认为在柱子内不保留呢?个人对这些问题有些模糊哪,期待你回复
4楼2014-03-25 17:30:18
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cindyA

铁虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by maxmahao at 2014-03-25 15:03:42
走梯度啊,后面乙腈比例往上走即可

恩,谢谢啦
5楼2014-03-25 17:36:48
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maxmahao

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by cindyA at 2014-03-25 17:30:18
是的吗?这是我自己摸得条件哪,我刚也想了一下,你的建议对我很有帮助,目标化合物保留时间是不是在5min之后才好,一般几分钟之内的我们可以认为在柱子内不保留呢?个人对这些问题有些模糊哪,期待你回复...

几分钟出峰合适的这个概念,我觉得应当具体而论
一个简单的办法,看死体积出峰时间,也就是溶剂峰啊等等出峰位置,此时的时间5倍左右我觉得是比较合适的出峰时间,当然我说的是单标的时候,时间总长度一般应是出峰时间的三倍。这个都是针对单标而言的,供LZ参考

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6楼2014-03-25 18:34:06
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fagui168

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by cindyA at 2014-03-25 17:30:18
是的吗?这是我自己摸得条件哪,我刚也想了一下,你的建议对我很有帮助,目标化合物保留时间是不是在5min之后才好,一般几分钟之内的我们可以认为在柱子内不保留呢?个人对这些问题有些模糊哪,期待你回复...

你可以进一针空白溶剂看一下 溶剂出峰的时间 那个基本就是咱们不需要的时间段。大概5min之内吧  不过也不一定  不能一概而论,一般在2-3min的可以确定是不保留吧。
改变你不能改变的,适应你不能适应的
7楼2014-03-25 18:49:34
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cindyA

铁虫 (初入文坛)

各位大侠又来求助啦,还是之前的问题,我把流动相比例调到乙腈45,结果产物推迟到7.5 min了,(后面也没有杂质峰,估计之前做得一批样不纯吧)。因为上面的产品还要成盐,今天我们将上面的产品做了成盐的反应,又进了液相,结果没有出现明显的主峰,在9min 和11min出现了两个稍微大的峰,分别是10 mV 和15mV(感觉峰高太小了,像杂质峰,之前做得目标化合物的峰至少也七八十个mV),7.5min的峰没有啦,不知道怎么回事呢?各位大侠有知道的吗?谢啦
8楼2014-03-26 15:15:51
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