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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 苯酚氯仿异戊醇提取质粒DNA
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380218013

金虫 (小有名气)

[求助] 苯酚氯仿异戊醇提取质粒DNA 已有1人参与

请问，用苯酚氯仿异戊醇方法提取质粒DNA。没有异戊醇了，可以用异丙醇代替吗，为什么？
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好好生活，努力赚钱
1楼 2014-03-24 14:15:37
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猪尾巴草

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-24 16:27:25
不可替代，因为异丙醇溶于水，异戊醇微溶于水。原理：异戊醇的添加，其作用主要减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡。异戊醇可以降低表面张力，从而减少气泡产生。另外，异戊醇有助于分相，使离心后的上层含DNA的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定，方便了水相的回收。其实，抽提质粒时，可以省掉加苯酚氯仿异戊醇这一步，对后面抽提质粒检验，酶切，PCR，没有多大影响。
  希望对你有帮助。
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2楼2014-03-24 15:30:28
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