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hihe99

银虫 (小有名气)

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[求助] PCR重复不出来啊，求助啊已有1人参与

先前p出来的东西，现在重做，总是p不出来。而且，按50配的体系，分成2管25，在同一个PCR仪上反应，一个有产物一个没有，做了几次了，都这样。如图。
是什么原因啊，该怎么办呢。急啊！！！！

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1楼 2014-03-23 21:57:23

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Jacob_24

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引用回帖:

5楼: Originally posted by zeroon at 2014-04-03 16:42:29
请问加DMSO是干嘛用的？谢谢...

DMSO为无色无臭粘稠液体,可溶于水和乙醇、丙酮、乙醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂,工业上被用做溶剂和萃取剂.由于其溶于水的特性,故能与PCR的整个反应体系充分混合.作为一种变性剂,DMSO可直接解除模板DNA的局部二级结构,从而增加引物与模板的特异性结合,降低非特异性结合,最终获得满意的扩增效果.另一方面,DMSO浓度过高时又同时使Taq酶变性失活,反而降低扩增效率.DMSO is used in PCR to inhibit secondary structures in the DNA template or the DNA primers. It is added to the PCR mix before reacting, where it interferes with the self-complementarity of the DNA, preventing the occurrence of interfering reactions. However, use of DMSO in PCR increases the mutation rate.