应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR结果不好，胶回收后浓度很低
51/1返回列表
查看: 5484  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

anmengdy

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR结果不好，胶回收后浓度很低 已有2人参与

最近在做分子实验，好多东西不清楚，我们实验室之前做化学的，所以也没师兄师姐，老师可以问。
跑了PCR，好像引物二聚体比较严重，拖带，条带不够亮，胶回收之后浓度别低，想问问大家出了什么问题，怎么解决！

PCR结果不好，胶回收后浓度很低
sulII.gif


PCR结果不好，胶回收后浓度很低-1
tetW.gif
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-03-13 12:05:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anmengdy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-03-13 15:39:24
1%的胶，90V，30min取出看看，不行接着跑。目的基因有150，不宜长时间电泳。...

好的，等下试下！
回复此楼
8楼2014-03-13 16:14:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

apety

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
anmengdy: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-03-13 15:13:22
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-03-13 19:00:01
我的问题：1、你的对照组是哪个？2、胶回收的时候要用大孔点样，如果你是用的第一个图切胶回收，那果断浓度低。3、试剂盒的操作步骤有误，切胶后溶胶时要轻微震荡，不要试剂盒上说多少分钟就多少分钟，一般55℃的时候，5min左右就可以，关键看胶有没有完全融化4、点样时速度要快，要不然样品会弥散的（一般不会。。。除非你点很久）5、提醒你注意一下。。。你跑胶的时间有点长，或者说胶浓度太低，条带最好在胶中间，你的条带都快跑到最下面去了
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2014-03-13 12:28:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
胶回收之后浓度别低，可以多扩几管回收。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2014-03-13 14:31:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anmengdy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by apety at 2014-03-13 12:28:24
我的问题：1、你的对照组是哪个？2、胶回收的时候要用大孔点样，如果你是用的第一个图切胶回收，那果断浓度低。3、试剂盒的操作步骤有误，切胶后溶胶时要轻微震荡，不要试剂盒上说多少分钟就多少分钟，一般55℃的时 ...

我没有做对照，回收的时候是大孔，第二图很亮的是引物二聚体，目的条带很浅，不知道怎么改进，因为目的基因比较小，一百多bp,用的是1.5%的胶，所以有点跑出去了，跑太短时间mark跑不开。回收可能融化时间过长了（10min,60℃)
赞一下 回复此楼
4楼2014-03-13 15:01:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[职场人生] 40+中年人失业后，还能找到好工作吗？ +11 xqy2009 2026-10-13 13/650 2026-10-15 21:32 by bear2007
[有机交流] 用NBS溴化时溶剂除了CCl4外还有什么 +3 18834002860 2026-10-12 6/300 2026-10-15 14:30 by 长沙摩尔信息科�
[基金申请] 申请科研项目纯靠实力能成功吗？ 200+7 David1982 2026-10-13 11/550 2026-10-15 10:30 by zyqchem
[论文投稿] 二审4个多月了还是Awaiting Reviewer Scores 10+3 纳斯达克ML 2026-10-11 4/200 2026-10-14 17:30 by babero
[有机交流] OpenAI又攻克数学难题了，离AI做有机合成还有多远？ +8 wangyl_123 2026-10-10 13/650 2026-10-14 15:12 by zuesli
[教师之家] 课题组会帮你通过考核么？ +4 好运来～9527 2026-10-10 7/350 2026-10-13 08:41 by xli1984
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:34 by XQNyDCa1Tk5n
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:15 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 22:11 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 14:25 by VOMexwnDzOFZ
[教师之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 14:05 by VOMexwnDzOFZ
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:51 by VOMexwnDzOFZ
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:45 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:54 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:34 by VOMexwnDzOFZ
[考博] 招收博士生一名 +3 mandolin 2026-10-10 3/150 2026-10-11 10:21 by 不是山谷！
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 4/200 2026-10-11 03:14 by M0zrYVSAnxpE
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭