应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 5'RACE总是不出结果，求大神帮助
51/1返回列表
查看: 1882  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

修香恋

铜虫 (小有名气)

[求助] 5'RACE总是不出结果，求大神帮助 已有2人参与

本人一直在做5'RACE，但总是没有结果。PCR得到的结果经测序后多次为载体序列，也出现过扩出别的基因的情况，但条带大小看着和预期的差不多。求大神给予指点，不胜感激！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-03-09 21:54:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

音四1990

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-11 20:08:02
这种货色我也做得出来哦，不是原创的，所谓改进无非是抄抄得了，我就不用试剂盒，自己做，也挺好
...

我很想自己做 试剂盒的引物快用完了 还有一个roche的太贵了不敢下手= =
5‘的Oligo（dG）和3’A尾其实都可以自己做的吧？我看很多大手都是自己合成引物和接头
赞一下 回复此楼
我没那种命啊轮也不会轮到我
9楼2014-04-12 09:54:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

音四1990

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
修香恋(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-08 12:18:29
你这个说的太笼统了啊…… RACE出不来有很多种可能的 模板RNA质量不好 cDNA反转录失败 引物特异性差 PCR体系不合适 退火温度和延伸时间不恰当 都是有可能的

另外按照我老师说的经验 RACE中出现一些非预计大小的片段很正常 这些片段很有可能是目的基因中的一段 或是其他基因 稍稍研究一下 说不清会有惊喜的
赞一下 回复此楼
我没那种命啊轮也不会轮到我
2楼2014-04-08 11:17:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

修香恋

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 音四1990 at 2014-04-08 11:17:52
你这个说的太笼统了啊…… RACE出不来有很多种可能的 模板RNA质量不好 cDNA反转录失败 引物特异性差 PCR体系不合适 退火温度和延伸时间不恰当 都是有可能的

另外按照我老师说的经验 RACE中出现一些非预计大小的片 ...

谢谢啦!但是我测序之后发现只是通用引物在扩增，找不到自己的特异引物。而且我引物已经设了十条了，都没有结果。请问一下如何判断提取的RNA是否可以用于RACE？
赞一下 回复此楼
3楼2014-04-09 11:10:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2014-04-30 13:58:03
RACE中得到假阳性结果是很正常的

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
4楼2014-04-09 21:48:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 6PrO1XyZ5URF 2026-11-13 3/150 2026-11-15 16:23 by 0aDbZAghdVq9
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 6PrO1XyZ5URF 2026-11-13 3/150 2026-11-15 16:12 by 0aDbZAghdVq9
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 TZqyNTBa07NP 2026-11-13 3/150 2026-11-15 11:58 by xSrQNSSjcgoX
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 XJXMuRjD7cK7 2026-11-13 3/150 2026-11-15 05:22 by xSrQNSSjcgoX
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 uKOSCocCb6Fm 2026-11-13 3/150 2026-11-15 04:38 by xSrQNSSjcgoX
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 uKOSCocCb6Fm 2026-11-12 7/350 2026-11-15 02:48 by xSrQNSSjcgoX
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 gRND4NVAZ8VG 2026-11-11 5/250 2026-11-13 11:15 by Equinoxhua
[考博] 27博士申请（市政/环境） +3 ladf 2026-11-12 3/150 2026-11-13 08:19 by Equinoxhua
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 13:02 by ECLTXnJnRSXf
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 12:28 by ECLTXnJnRSXf
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-11 5/250 2026-11-12 11:44 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 6/300 2026-11-12 11:22 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 5/250 2026-11-12 11:14 by HajghKOMynmz
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 7/350 2026-11-12 10:49 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 8/400 2026-11-12 10:49 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:38 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 08:15 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 6/300 2026-11-12 07:09 by 9fOTqj074tIg
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 5/250 2026-11-12 06:03 by 9fOTqj074tIg
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 8/400 2026-11-12 05:08 by 9fOTqj074tIg
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭